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ssDNA/RNA 环化连接酶
价格：￥ 2,000U/600;20KU/4000
品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/15 11:05:14
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详细内容
ssDNA/RNA 环化连接酶
描述：ssDNA/RNA CircLigase 为热稳定的 DNA/RNA 连接酶，不
依赖于 ATP，可催化单链 DNA 或单链 RNA 的分子内环化。环化
反应中，要求催化底物单链 DNA/RNA 具有 5’-磷酸基团和 3’-OH
基团。对于大于 15nt 的单链底物，该酶都能高效的连接。
组分
活性定义： 60°C 1h 条件下，催化 1pmol 5’-磷酸化的 ssDNA 底物环化，所需的酶量定义为 1Unit。
储存：-20℃可保存 3 年。
反应实例
1. 按以下组分配制反应液
2. 失活反应
反应结束后，可加入终浓度 10 mM EDTA 终止反应。或采用加热
方式 85℃ 10min 加热失活。
使用注意事项：
(1) 环化底物 ssDNA 或 RNA 必须带有 5’磷酸基团，3’端含有 OH。该酶对底物的末端碱基，具有偏好性。推荐 5’首碱基为 G（连接效率 G>A, T 和 C 几乎不连接）。3’末端推荐 T或 A 碱基（T≥A>>G/C）。
(2) 环化体系中的 ATP 浓度高于 20µM 以上时会极大抑制环化效率，甚至导致环化失败。因此建议底物为纯化产物。
(3) 该酶在 50⁻⁷0℃条件下均具有活性，最佳反应温度为60℃，必要时可自行调整。
(4) 本酶主要进行分子内环化连接，分子间的连接未检测到。
(5) 本酶对 ssDNA 和 RNA 的环化效率极高，多数情况下，90%以上的底物被环化。未被环化的 ssDNA 可通过加入0.25U/µl 的 Exonuclease I，37°C 消化 15min 去除，以获得高纯度的环化 ssDNA。未环化的 ssRNA，将稍
后给出去除方案。
(6) 本酶可以连接 15-nt 以上的核苷酸，测试的最长 ssDNA 为 110nt（连接效率>90%）。
(7) 在小体系实验时注意体系的蒸发，可加入矿物油以防止蒸发。
注意事项：该产品仅供科研使用，不得用于临床诊断及其他用途，产品说明书以到货说明书为准，网站说明书仅供参考！
热门标签：ssDNA/RNA,环化连接酶,ssDNA/RNA,环化连接酶
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