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T4 RNA连接酶1(10U/μl)
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详细内容
T4 RNA连接酶1(10U/µl)
描述:催化 3’→5’磷酸二酯键的形成,使核苷酸的 5’-磷酸
末端和3’-羟基末端连接,伴随着ATP水解为AMP和PPi。
作用底物包括单链 RNA、DNA 及二核苷焦磷酸,它可催
化 ssDNA 和 RNA 的连接。
组分
应用
连接单链 RNA 和 DNA
RNA 3’末端标记
RNA 和 DNA 分子内和分子间连接
储存:-20℃可保存 3 年。
活性定义:1 单位指在 1×T4 RNA Ligase Buffer 中,37℃条件下,30 分钟内将 1nmol 的 5’-[
32P]rA16 转化为磷酸盐不溶物质所需要的酶量。

使用注意事项
(1)1×T4 RNA Ligase Buffer:50 mM Tris-HCl pH 7.5,10 mM MgCl2,1 mM DTT。该酶反应时需要加入终浓度1 mM ATP。
(2)最佳反应温度 37℃,65℃ 10min 可使该酶失活。
(3)该酶的连接底物无论是 ssDNA 还是 ssRNA 均需要5’-磷酸化或预腺苷化。
(4)该酶不能连接双链 DNA 或 RNA。
(5)加入终浓度 20% PEG 8000 或增加孵育时间可提高连接效率。
使用方法
1. 配制如下反应体系 (20 µl)

2. 25℃反应 1-2h。
3. 10mM EDTA 或 65℃15min,终止反应。
注意事项:该产品仅供科研使用,不得用于临床诊断及其他用途,产品说明书以到货说明书为准,网站说明书仅供参考!
热门标签:T4,RNA连接酶1(10U/μl),T4,RNA连接酶1,0U/μl
















