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pcDNA3.1-3xFlag-C载体
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详细内容
pcDNA3.1-3xFlag-C载体
产品规格:2ug
产品货号:XY9741VT
基本信息
| 质粒类型: | 哺乳动物表达载体 |
|---|---|
| 载体大小: | 5496 bp (查看载体序列) |
| 5' 测序引物: | CMV-F:CTAGAGAACCCACTGCTTAC |
| 3' 测序引物: | BGH-R:TAGAAGGCACAGTCGAGG |
| 载体抗性: | Ampicillin (氨苄青霉素) |
| 筛选标记: | G418 |
| 载体标签: | 3xFlag |
质粒图谱


应用领域
蛋白表达与纯化:将目的基因插入到载体的多克隆位点,在哺乳动物细胞中表达出带有 3xFlag 标签的融合蛋白,利用抗 Flag 抗体的亲和层析柱可对融合蛋白进行纯化,获得高纯度的目的蛋白,用于后续的结构与功能研究。
蛋白定位研究:借助抗 Flag 抗体与 3xFlag 标签的特异性结合,通过免疫荧光、免疫组化等技术手段,可以对目的蛋白在细胞内的定位进行研究,了解其在细胞内的分布情况和作用位点。
蛋白相互作用研究:利用带有 3xFlag 标签的蛋白作为诱饵,通过免疫共沉淀等实验方法,可捕获与之相互作用的蛋白,进而通过质谱分析等技术鉴定相互作用蛋白的种类,揭示蛋白之间的相互作用网络和信号通路。
使用方法
质粒提取:将含有该载体的大肠杆菌在含有氨苄青霉素的培养基中培养,然后通过碱裂解法等常规方法提取质粒。
基因克隆:设计带有合适酶切位点的引物,通过 PCR 扩增目的基因片段,然后将目的基因片段和载体分别用相应的限制性内切酶进行酶切,再用 DNA 连接酶将两者连接起来,构建成重组表达载体。
细胞转染:将重组表达载体转染到哺乳动物细胞中,可采用脂质体转染法、电穿孔法等方法。转染后,在含有 G418 的培养基中培养细胞,筛选出稳定转染的细胞株。
蛋白表达与检测:在稳定转染的细胞株中,目的基因在 CMV 启动子的驱动下表达出融合蛋白。可通过 Western blot、ELISA 等方法检测蛋白的表达情况,利用免疫荧光、免疫组化等方法对蛋白进行定位分析。
注意事项:该产品仅供科研使用,不得用于临床诊断及其他用途,产品说明书以到货说明书为准,网站说明书仅供参考!
热门标签:pcDNA3.1-3xFlag-C载体,pcDNA3.1-3xFlag-C质粒,pcDNA3.1-3xFlag-C















