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HotStart Bst4.2 Basic Bead(冻干球)-70℃反应
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详细内容
HotStart Bst4.2 Basic Bead(冻干球)⁻⁷0℃反应
描述:该制品为全体系冻干微球制品,包含了 HotStart Bst4.2 DNA/RNA 聚合酶、Helicaser、dNTP、Mg2+、反应缓冲盐、 冻干赋形剂,单球扩增体系为 25 µl。
Bst4.2 具有以下性能:(1)Bst 4.2 包含热启动 Aptamer,
该配体确保酶在<30°C 时,酶活封闭效率>90%,在>60°C 时
1min 内完全释放酶活。该特性利于室温建立反应体系,并
大幅降低了低温条件下的非特异扩增;(2)反应温度提升到
70°C,大幅降低引物 Dimer 的形成,提高扩增特异性,并使得粗样品核酸释放更加充分;(3)包含 Helicaser,因此,
允许在不使用 F3/B3 引物的情况下进行 eLAMP 扩增(easy
LAMP),并允许 FIP/BIP 的引物用量降低一倍。这将进一步
降低非特异扩增,并使得扩增均一性大幅提升。
本品为多用途的试剂,适用于 LAMP 进行 Molecular
Beacon 探针、DP-LAMP 探针、试纸条等检测。
组分
注意事项:
(1) -20°C 以下干燥密封保存(24 个月有效);室温干燥密封保存(6 个月有效)。由于制品为冻干形态,极易吸潮,在制品开封后,推荐放置-20 度以下保存 12 个月。
(2) 10xGuHCl 为 500 mM,1x 下 50 mM 的 GuHCl 能显著加速 LAMP 扩增约 3~4min。推荐采用 250 mM 或 500 mM的 GuHCl 来裂解、变性样本后,一起加入反应体积(5 µl或 2.5 µl)。
(3) Bst4.2 在用于 LAMP 扩增时的推荐反应温度为 70°C。由于 Helicaser 的反应温度为 70°C,因此该酶在 65°C 扩增时,性能会大幅下降。
(4) 冻干球直径约 2.6mm。
(5) 防止气溶胶污染,尽可能进行分区操作。

使用方法
1. 10xLAMP Primer Mix 的准备
注意:eLAMP(easy LAMP)为去除 F3/B3 引物的方法,为
Bst4.2-3.2 系列专用的使用策略,对于大多数引物组,在 Helicaser
的加持下,扩增速度几乎不受影响。
2. 配制 LAMP 反应体系
3. 反应体系配好后,置于 70°C 反应 20~40min
注意事项:该产品仅供科研使用,不得用于临床诊断及其他用途,产品说明书以到货说明书为准,网站说明书仅供参考!
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