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血液基因组DNA大量提取试剂盒
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详细内容
血液基因组DNA大量提取试剂盒
B l o o d M a x i G e n o m i c D N A P u r i f i c a t i o n K i t
( 离 心 柱 型 )
产品及特点:
本试剂盒适用于各种新鲜及抗凝剂(柠檬酸钠、EDTA 等)处理过的全血基因组 DNA
大量提取。DNA 特异吸附到硅胶膜上,通过简单漂洗去除杂质,可快速纯化得到基因组
DNA。使用本试剂盒得到的血液基因组 DNA 无蛋白、核酸酶污染,可直接进行 PCR、
酶切和杂交等分子生物学实验。它具有下列特点:
1. 操作简便:无需有机试剂沉淀,可快速获得高纯度的血液基因组 DNA;
2. 纯度高:去除污染物和抑制剂,便于下游应用。
产品货号:XY910303
产品规格:10T/1050元、50T/4050元
成分规格:
保存条件
蛋白酶 K 于-20℃,其他组分室温(15 - 25℃),可保存 12 个月。
使用方法
自备试剂
无水乙醇、RNase A(可选)。
(注意:a.使用前请先在缓冲液 Buffer W1 和 Buffer W2 中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶上的标
签; b.把 10×红细胞裂解液 RBL 稀释成 1×工作液)
1. 处理样品:取 10-20 ml 全血于 50 ml 离心管中,加入 1.5 倍体积细胞裂解液 RBL 颠倒在混匀 10 次,5,000 rpm 离心 3 min,倒弃上清;重复 1-2 次,直到红细胞充分裂解;
(注意:细胞裂解液 RBL 处理步骤应小心操作,为避免沉淀被倒出,推荐使用尖底离心管。在极少
的情况下细胞裂解液 RBL 处理得到的沉淀可能会很松弛,所以要缓慢倒上清。)
2. 加入 200ul Proteinase K 和 10 ml 缓冲液 GTL,立即上下剧烈震荡或涡旋混匀至溶液混
合均匀。
3. 加入 10ml Buffer GL 涡旋混匀。
4. 56℃水浴 10-30 min。每隔 3 min 振荡一次,以助裂解,如遇特殊样本,未能很好裂解,
请适当延长孵育时间。
5. 加入 20 ml 无水乙醇,充分震荡,短暂离心以去除管盖内壁液体。
6. 将吸附柱放入收集管,将上一步所得溶液分次加入吸附柱中,10,000 rpm 离心 1 min,
弃收集管中滤液。
7. 向吸附柱内加入 10 ml Buffer W1,室温 10,000 rpm 离心 1 min,弃收集管中滤液。
(注意:按要求在 Buffer W1 中加入无水乙醇,用后及时盖紧,以防乙醇挥发)
8. 向吸附柱内加入 10 ml Buffer W2,室温 10,000 rpm 离心 1 min,弃收集管中滤液。
(注意:Buffer W2 是浓缩液,按要求加入无水乙醇,用后及时盖紧,以防乙醇挥发)
9. 向吸附柱内加入 5 ml Buffer W2,室温 10,000 rpm 离心 10 min,弃收集管中废液。
(注意:此步不能省略,否则残留乙醇会影响基因组 DNA 的后续使用)
10. 将离心吸附柱置于一个新的 15 ml 塑料离心管(自备)中,开盖于空气中 5min,加入
300-1000 ul Buffer EB,室温放置 5 min,10,000 rpm 离心 2 min,离心管底溶液即基因
组 DNA。
(注意:为增加洗脱效率,可将洗脱液 Buffer EB 在 60℃预热。如需使用去离子水洗脱,可用 NaOH
调整其pH值在7.0 - 8.5之间,为了增加回收率,可将得到的溶液重新加入到吸附柱中,室温放置2 min,
再次离心收集)
注意事项
●如 Buffer GL 产生沉淀,可在 56℃水浴溶解;
●样品应避免反复冻融,否则会导致提取的 DNA 片段小,提取量下降;
●所有离心步骤均为台式离心机,室温下操作
●按要求在 Buffer W1 和 Buffer W2 中加入无水乙醇。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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