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HotStart Bst 4.0 DNA/RNA Polymerase(16U/ul) 无甘油
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详细内容
HotStart Bst 4.0 DNA/RNA Polymerase(16U/ul) 无甘油
描述:HotStart Bst 4.0 DNA/RNA Polymerase 为 HotStart
Bst 2.0 DNA 聚合酶和极其耐热的 ThermoStable V RTase
反转录酶(耐受 65°C)的混合品,该酶适合于 RNA 的 LAMP
反应。
与 Bst4.0 相比,HS Bst4.0 包含热启动 Aptamer,该配
体确保 Bst 酶在<30°C 时,酶活封闭效率>90%,在>60°C 时
1min 内完全释放酶活。该特性利于室温建立反应体系,并大
幅降低了低温条件下的非特异扩增。除此外,该酶为无甘油
版本,其适合进行全体系冻干制品生产。
组分
注意: HotStart Bst4.0 DNA Polymerase(16U/µl)与 10×IsoAmp
Buffer2 均不含甘油,可用于冻干体系。10xGuHCl 为 500 mM,1x
下 50 mM 的 GuHCl 能显著加速 LAMP 扩增约 3~4min,必要时还可
以作为样本的裂解液。
单位定义:一个活力单位即在 65°C 条件下,30 分钟内催化
10nmol dNTP 的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量。
储存:长期保存请置于-20°C 以下(2 年有效);制品反复冻
融 10 次不影响性能,但应避免反复冻融;制品一经融化推荐
置于 2-8°C 保存,在此条件下制品稳定储存 1 个月。

其它说明:
(1) HotStart Bst 2.0& 4.0 Polymerase 在用于 LAMP 扩增
时的推荐反应温度为 65°C。
(2) 制品中包含高浓度的盐组分,使用时做好个人防护,
防止制品与皮肤、眼、鼻、呼吸道等接触和吸入,一旦接触
或吸入,请用大量的清水冲洗。
(3)防止气溶胶污染,尽可能进行分区操作。
典型的 LAMP 反应
1. 按以下组分配制 LAMP 反应液

*10X Primers:16 µM FIP/BIP, 2 µM F3/B3, 4 µM LoopF/B
each。
2. 65°C 30~60min; 85°C 5min 失活。
使用注意事项:
(1)Mg2+的使用浓度为 4~10 mM 浓度,IsoBuffer 中没有Mg2+,通常情况下,在 6-8 mMMg2+条件下可获得较好的 LAMP 结果。
(2) dNTP 推荐的使用浓度为 1 mM,必要条件下可在0.5~ 1.25 mM 间调整。
(3) 使用无模板 DNA 作为对照检测扩增的特异性。
(4) GuHCl 具有强腐蚀性,不建议冻干入球,推荐采用250 mM 或 500 mM 的 GuHCl 来裂解、变性样本后,一起加入反应体积(5 µl 或 2.5 µl)。
注意事项:该产品仅供科研使用,不得用于临床诊断及其他用途,产品说明书以到货说明书为准,网站说明书仅供参考!
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