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Lyophilized DualStart 3GmTTx DNA/RNA qPCR Bead
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详细内容
Lyophilized DualStart 3GmTTx DNA/RNA qPCR Bead
描述:DualStart 3GmTTx qPCR Bead 中包含核酸适配体 封闭的热启动 3GTaq DNA 聚合酶、极度耐热逆转录酶 (Extreme ThermoStable Reverse Transcriptase, ET RTase)、dNTP、Mg2+激活剂(Activator)、Mg2+与冻干赋形 剂。该制品仅在 Mg2+条件下(无需 Mn2+),即可对于 DNA 和 RNA 进行无偏差扩增。其为 TaqMan PCR 的专用试剂 (不含 ROX),可以高灵敏的检测 DNA 和 RNA 分子。得益 于耐受 95℃高温的 ET RTase,无论是 DNA 或 RNA 病毒, 均可通过加热反应来释放样本中的核酸分子,并用于后续 PCR 扩增。因此,粗制样本该试剂可以直接进行检测,无 需核酸纯化。
试剂特性:
(1)3GTaq 酶和 ET RTase 均为核酸适配体
(Aptamer)封闭的热启动酶(30°C 以下活性封闭>90%),
在 50°C 以上完全恢复活性,并全程调节 PCR 扩增。除此
外,在反应初始阶段,Blocker 对反应体系的Mg2+进行完
全封闭,聚合酶活性被完全阻断,在 95°C 加热 2min 后,
Activator 水解掉 Blocker,Mg2+得以释放,从而启动扩增反
应,从而实现双重热启动功能。
(2)ET RTase 在 95°C 加热
15min 后仍然保留全部活性,该酶通过修改 TTx 酶配体中
心,使其逆转录活性,由 Mn2+依赖变为Mg2+,这种变化使
得 RT-PCR 得一同步化。
(3)以 RNA 为模板进行 RT-PCR
扩增的最大长度为 500 bp,扩增效率最高的长度为 70-150
bp。
组分
注意事项:
(1) -20°C 以下干燥密封保存(60 个月有效);室温干燥
密封保存(12 个月有效)。由于制品为冻干形态,极易吸
潮,在制品开封后,推荐放置-20°C 以下保存 24 个月。
(2) 冻干球直径约 2.6mm。

操作方法
1. 按照如下组分配制 25 µl PCR 反应体系

2. DNA 的 qPCR 反应程序:
3. RNA 的 qPCR 反应程序:
注意事项:该产品仅供科研使用,不得用于临床诊断及其他用途,产品说明书以到货说明书为准,网站说明书仅供参考!
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