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Chemi HotStart 3GTaq Polymerase(5U/μl)(无甘油)
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详细内容
Chemi HotStart 3GTaq Polymerase(5U/µl)(无甘油)
描述:3GTaq DNA Polymerase 为第三代 Taq DNA 聚合酶,
具有 5’-3’外切酶活性,不具有 3’-5’外切酶活性,其具有最高
的杂质耐受性(对乙醇、胍盐、肝素具有极高的耐受性),
因此对于纯度较差的 DNA 模板,该酶仍然可以获得理想的
实验结果。Chemi Hotstart 3GTaq DNA Polymerase 为化学
法修饰的 HotStart 版本,其在 50°C 以下 100%无活性,只
有 95°C 条件下加热 5min 后才能完全恢复酶的活力。因此
该系统可以有效抑制非特异性 PCR 扩增,极大的提高了
PCR 扩增特异性和灵敏度。该酶配有独特的反应缓冲液,可
在宽范围中得到良好的扩增结果、检测灵敏度更高、信号更
强。
组分
(1)活性定义:一个活力单位指 74°C 条件下,30min 催化 10 nmoldNTP 的掺入反应,成为酸不溶性物质所需的酶量。
(2)PCR 反应性能:以 λDNA 为模板,扩增 4kb DNA 片段;以人类基因组 DNA 为模板,扩增 2kb DNA 片段。
(3)1XChemi 3GTaq Buffer 含 2 mM Mg2+,其是该酶的专用Buffer,在其它 Buffer 中可能不工作。该酶必须经 95 度加热 5min后才能恢复活性,缩短时间可能会导致扩增失败。
(4)酶储存 Buffer:10 mM Tris-HCl,pH7.5, 150 mM NaCl, 2 mMDTT, 10%Trehalose, 0.5%甘油。
(5)储存条件:-20°C 可保存 3 年。

使用说明:
1. 按照如下组分配制 50 µl PCR 反应体系

2. 推荐的“万能 PCR 扩增参数”
特殊说明:(1)该“万能 PCR 扩增参数”在实际应用中,
引物 TM 值(50⁻⁷0°C)范围内均获得良好的扩增。该程序
扩增总循环数为 28(5+23),如产物扩增亮度不足,则增加
循环 2 的次数到 25-28 个,通常不宜超过 28。(2)如果仍
然不能获得良好的扩增结果,则可以改变,循环 2 中的退火
温度为 50-65°C(上表中为 55°C)。(3)95°C 热启动 5min
是该酶的必须步骤,不能随意删除或缩减时间。
使用注意事项(必读)
(1) 该酶尤其适用于多重扩增和定量 PCR(染料法和
TaqMan 探针法均适用),其是已知的聚合酶中扩增特异性最佳的酶。
(2) 扩增片段 GC 含量>65%时,推荐添加 5xQ Solution至 1x 浓度,来提升高 GC 含量的扩增性能。
(3) Mg
2+通常情况下采用终浓度 2 mM,但在 qPCR 扩增时有时需要提高到 3.5 mM。
(4) 经 测试,使用该制品可能进行冻干 PCR 的生产。
注意事项:该产品仅供科研使用,不得用于临床诊断及其他用途,产品说明书以到货说明书为准,网站说明书仅供参考!
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