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pKO-11
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详细内容
pKO-11
中文名称:pKO-11
产品规格:2ug
产品货号:XY92239VT
运输:常温
保存:-20°C
有效期:两年
货期:一周
其他:多克隆位点经测序验证

质粒类型:属于未明确具体类型的质粒,但已知是一种 promoter cloning vector(启动子克隆载体)。
大小:3935bp。
结构特点
多克隆位点:具有多个酶切位点,便于外源基因的插入,如 EcoRI、HindIII、PstI 等酶切位点,可用于克隆不同的目的基因。
筛选标记:利用表达无启动子的 galk 基因进行阳性或颜色(MacConkey 半乳糖指示平板)筛选。在含有半乳糖的 MacConkey 培养基上,galk 基因表达的菌株会产生颜色变化,便于筛选出含有重组质粒的菌株。
功能特性
基因克隆:可用于将目的基因克隆到载体上,实现目的基因的扩增和保存。通过将目的基因插入到多克隆位点中,然后转化到宿主细胞中,如大肠杆菌,可大量复制和保存目的基因。
启动子分析:作为启动子克隆载体,可用于研究基因的启动子功能。将待研究的启动子片段克隆到 pKO-11 载体中 galk 基因的上游,通过检测 galk 基因的表达情况,来分析启动子的活性和调控元件。
宿主范围:主要适用于大肠杆菌,如 E. coli galk-、E. coli JA221、E. coli N100、E. coli N99 等菌株。
使用方法
质粒提取:从含有 pKO-11 载体的菌株中提取质粒,可采用碱裂解法等常规的质粒提取方法。
酶切反应:用相应的限制性内切酶对 pKO-11 载体和目的基因进行酶切,使两者产生互补的粘性末端或平末端。
连接反应:将酶切后的载体和目的基因片段用 DNA 连接酶进行连接,构建成重组质粒。
转化宿主细胞:将重组质粒转化到合适的大肠杆菌宿主细胞中,如通过热激法或电转化法等。
筛选阳性克隆:在含有相应筛选标记的培养基上筛选出含有重组质粒的阳性克隆,如在 MacConkey 半乳糖指示平板上筛选 galk 基因表达的克隆。
注意事项:该产品仅供科研使用,不得用于临床诊断及其他用途,产品说明书以到货说明书为准,网站说明书仅供参考!
热门标签:pKO-11,pKO-11载体,,,,pKO-11质粒















