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YEp368
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详细内容
YEp368
中文名称:YEp368
产品规格:2ug
产品货号:XY94172VT
运输:常温
保存:-20°C
有效期:两年
货期:一周
其他:多克隆位点经测序验证

基本信息
全称:Yeast Episomal Plasmid 368,即酵母附加体质粒 368。
性质:属于酵母附加体型载体(YEp),这类载体一般由大肠杆菌质粒、2µm 质粒以及酵母染色体的选择标记构成。
功能用途:主要用于构建 LacZ 融合蛋白,在基因克隆、基因表达调控研究以及蛋白功能分析等方面具有重要作用。
结构特点
复制起点:包含 2µm 质粒的复制起点,这使得 YEp368 载体能够在酵母细胞中自主复制,并且可以获得较高的拷贝数,一般每个细胞中可含有 20-50 个甚至更多拷贝。
选择标记:带有 Leu2 标记基因,用于筛选转化成功的酵母细胞。Leu2 基因编码酵母细胞合成亮氨酸所需的一种酶,当酵母细胞在缺乏亮氨酸的培养基上生长时,只有成功导入含有 Leu2 基因的 YEp368 载体的细胞才能正常生长。
多克隆位点:具有多克隆位点(MCS),方便外源基因的插入。在 YEp368R 中,MCS 是反向的,这为不同的克隆策略提供了更多选择。
工作原理
转化:将构建好的含有目的基因的 YEp368 载体通过转化的方法导入酵母细胞中,常用的转化方法有化学转化法、电转化法等。
复制与表达:进入酵母细胞后,由于载体具有 2µm 质粒的复制起点,可在酵母细胞内自主复制,随着酵母细胞的分裂,载体也会不断复制并传递到子代细胞中。同时,如果目的基因连接在合适的启动子下游,就可以在酵母细胞中实现表达。
筛选与鉴定:利用 Leu2 选择标记,在缺乏亮氨酸的培养基上筛选出转化成功的酵母细胞。然后通过菌落 PCR、酶切鉴定、测序等方法进一步验证目的基因是否正确插入到载体中。
注意事项:该产品仅供科研使用,不得用于临床诊断及其他用途,产品说明书以到货说明书为准,网站说明书仅供参考!
热门标签:YEp368,YEp368载体,,,,YEp368质粒















