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pFB-LIC-Bse
价格：￥ 990
品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/22 8:30:49
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旗舰版网址：http://www.xybio-sh.com
详细内容
pFB-LIC-Bse
中文名称：pFB-LIC-Bse
产品规格：2ug
产品货号：XY91583VT
运输：常温
保存：-20°C
有效期：两年
货期：一周
其他：多克隆位点经测序验证
结构特点
融合标签：包含一个 N 端的 6xHis-Tev cassette，即 6 个组氨酸标签串联，后面连接 Tev 蛋白酶切割位点。组氨酸标签可以方便对表达的重组蛋白进行亲和纯化，Tev 蛋白酶切割位点则可用于在纯化后去除标签，以获得天然结构的目标蛋白。
克隆位点：具有用于 LIC（Ligation-Independent Cloning，连接独立克隆）的位点，LIC 方法可以高效地将目的基因插入到载体中，无需传统的连接酶反应，提高了克隆效率和准确性。
负选择标记：含有 sacb 基因作为负选择标记，可用于筛选含有正确插入片段的重组质粒。在含有特定糖的培养基中，sacb 基因表达的产物会对细胞产生毒性，而没有正确插入目的基因的载体由于 sacb 基因表达而无法生长，从而方便筛选出阳性克隆。
抗性基因：携带氨苄青霉素抗性基因（ampicillin resistance），使宿主菌在含有氨苄青霉素的培养基中能够生长，便于对重组质粒进行筛选和扩增。
使用方法
目的基因克隆：设计带有与 pFB-LIC-Bse 载体 LIC 位点互补末端的引物，通过 PCR 扩增获得目的基因片段。将载体和目的基因片段进行 LIC 反应，使目的基因插入到载体中，构建成重组质粒。
转化与筛选：将重组质粒转化到感受态细胞中，如 DH10Bac 感受态细胞。在含有氨苄青霉素以及根据 sacb 基因筛选条件的培养基上进行筛选，挑取阳性克隆进行培养和鉴定。
病毒制备与蛋白表达：将鉴定正确的重组质粒转染昆虫细胞，如 sf9 细胞，经过一段时间的培养，产生重组杆状病毒。再用重组杆状病毒感染昆虫细胞，即可启动目的基因的表达，在昆虫细胞中大量合成重组蛋白。
注意事项：该产品仅供科研使用，不得用于临床诊断及其他用途，产品说明书以到货说明书为准，网站说明书仅供参考！
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