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pMetLuc2-Control
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详细内容
pMetLuc2-Control
中文名称:pMetLuc2-Control
产品规格:2ug
产品货号:XY92720VT
运输:常温
保存:-20°C
有效期:两年
货期:一周
其他:多克隆位点经测序验证

名称:pMetLuc2-Control,其中 “p” 代表质粒,“MetLuc2” 表示分泌型海萤荧光素酶基因,“Control” 表示该载体可作为对照载体用于实验。
结构特点
分泌型海萤荧光素酶基因:载体携带经过序列优化的分泌型海萤荧光素酶基因,可在哺乳动物细胞中高效表达,表达产物能够分泌到细胞外,便于后续的检测和分析。
启动子和调控元件:含有组成型启动子,如 SV40 启动子等,能够驱动海萤荧光素酶基因在多种哺乳动物细胞中持续稳定表达,为实验提供稳定的对照信号。
多克隆位点(MCS):具有多克隆位点,方便研究人员将感兴趣的基因或调控元件插入到载体中,以构建重组表达载体,用于研究基因表达调控等相关实验。
抗性基因:通常含有抗生素抗性基因,如氨苄青霉素抗性基因(ampr)等,可用于在细菌中筛选含有该载体的阳性克隆,便于载体的扩增和制备。
复制起点:具有哺乳动物细胞中可复制的起点,能在哺乳动物细胞中自主复制,保证载体在细胞中的稳定存在和遗传。
功能应用
作为对照载体:在基因表达调控实验中,可与实验载体一起共转染细胞,作为内对照来校正实验结果,消除不同转染效率、细胞活力等因素对实验的影响,提高实验的准确性和可靠性。
研究基因表达调控:通过将待研究的启动子或其他调控元件插入到多克隆位点,与海萤荧光素酶基因融合表达,然后检测荧光素酶的活性变化,来研究这些调控元件对基因表达的调控作用,例如分析不同组织特异性启动子在特定细胞中的活性。
药物筛选和细胞信号通路研究:在药物筛选实验中,可利用该载体检测药物对细胞内基因表达的影响;在细胞信号通路研究中,通过观察荧光素酶活性的变化,来揭示信号通路的激活或抑制对基因表达的调控机制。
使用方法
载体构建:使用限制性内切酶对 pMetLuc2-Control 载体和目的基因片段进行酶切,然后通过 DNA 连接酶将目的基因片段连接到载体的多克隆位点中,构建成重组 pMetLuc2-Control 载体。
细胞转染:将构建好的重组载体或 pMetLuc2-Control 对照载体采用合适的转染方法导入到目标哺乳动物细胞中,如脂质体转染法、电穿孔法等。
荧光素酶活性检测:在细胞转染后的适当时间点,收集细胞培养上清液或裂解细胞,加入海萤荧光素酶的底物,利用荧光检测仪检测荧光信号的强度,从而反映海萤荧光素酶的表达水平和活性,进而分析实验结果。
注意事项:该产品仅供科研使用,不得用于临床诊断及其他用途,产品说明书以到货说明书为准,网站说明书仅供参考!
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