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pcDNA3.1(-)/GFP
价格：￥ 990
品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:43:11
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详细内容
pcDNA3.1(-)/GFP
中文名称：pcDNA3.1(-)/GFP
产品规格：2ug
产品货号：XY9709VT
运输：常温
保存：-20°C
有效期：两年
货期：一周
其他：多克隆位点经测序验证
类型：哺乳动物表达载体，可用于在哺乳动物细胞中表达目的基因。
大小：pcDNA3.1 (-) 载体骨架大小一般为 5401bp 左右，加上 GFP 基因后，整个载体大小约为 6000bp 左右。
结构特点
启动子：通常含有 CMV（巨细胞病毒）启动子，能够在多种哺乳动物细胞中启动基因的转录，驱动 GFP 基因以及与之连接的目的基因的表达，使目的基因在哺乳动物细胞中实现高效表达。
GFP 基因：绿色荧光蛋白基因作为报告基因，可在荧光显微镜下直接观察到表达情况，便于对转染细胞进行筛选和追踪，也可用于研究基因表达的时空分布和细胞内蛋白的定位等。
抗性基因：原核抗性为氨苄青霉素抗性基因（Amp），用于在大肠杆菌中筛选含有该质粒的阳性克隆；真核筛选标记一般为新霉素抗性基因（Neomycin/G418），可在转染后的哺乳动物细胞中用 G418 进行筛选，只有成功转染了载体的细胞才能在含有 G418 的培养基中存活。
复制子：具有 pUC ori 复制子，可在大肠杆菌中进行高拷贝复制，便于质粒的大量扩增。
终止子：如 BGH poly (A) signal，可终止 mRNA 的转录，保证转录的准确性和稳定性。
作用与用途
基因表达研究：作为一种表达载体，可将目的基因导入哺乳动物细胞中，使其在细胞内表达相应的蛋白质，从而研究目的基因的功能、表达调控机制等。
细胞转染筛选：利用 GFP 的荧光特性，可快速筛选出成功转染了载体的细胞，便于后续对转染细胞的培养和研究。
蛋白定位研究：将目的基因与 GFP 基因融合表达，通过观察绿色荧光的分布情况，可确定目的蛋白在细胞内的定位，如细胞质、细胞核、细胞膜等。
基因功能验证：通过在细胞中过表达目的基因，观察细胞在形态、生长、分化、凋亡等方面的变化，验证目的基因的功能。
使用方法
载体构建：通过基因克隆技术，将目的基因插入到 pcDNA3.1 (-)/GFP 载体的多克隆位点中，构建成重组表达载体。
细胞转染：采用脂质体转染法、电穿孔法、磷酸钙共沉淀法等方法将重组载体导入哺乳动物细胞中。
筛选与鉴定：利用氨苄青霉素抗性在大肠杆菌中筛选出含有重组载体的阳性克隆；在哺乳动物细胞中，利用 G418 抗性筛选出稳定转染的细胞株，并通过荧光显微镜观察 GFP 的表达情况，以及采用 PCR、Western blot 等方法对目的基因的表达进行鉴定。
注意事项：该产品仅供科研使用，不得用于临床诊断及其他用途，产品说明书以到货说明书为准，网站说明书仅供参考！
热门标签：pcDNA3.1(-)/GFP,pcDNA3.1(-)/GFP载体,,,pcDNA3.1(-)/GFP,质粒
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