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pGEM-3ZF(+)
价格：￥ 990
品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:43:11
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详细内容
pGEM-3ZF(+)
中文名称：pGEM-3ZF(+)
产品规格：2ug
产品货号：XY91714VT
运输：常温
保存：-20°C
有效期：两年
货期：一周
其他：多克隆位点经测序验证
来源：是 pGEM-3Z 载体的衍生质粒，由美国 Promega 公司开发生产。
质粒大小：3197bp。
复制子：含有 ColE1 ori 和 F1 ori 复制起点，其中 F1 ori 用于产生单链 DNA，ColE1 ori 可在大肠杆菌中进行复制。
原核抗性：具有氨苄青霉素抗性基因（Amp），可用于在含有氨苄青霉素的培养基中筛选转化成功的大肠杆菌。
质粒标签：带有 LacZ 基因，可用于蓝白斑筛选。
结构特点
多克隆位点（MCS）：位于 α- 肽编码区域内，含有多个独特的限制性酶切位点，包括 EcoRI、SacI、KpnI、AvaI、SmaI、BamHI、XbaI、SalI、AccI、HincII、PstI、SphI 和 HindIII 等，方便外源 DNA 片段的插入。
启动子：在多克隆位点两侧分别有 T7 和 SP6 RNA 聚合酶启动子，可用于体外转录生成正义和反义 RNA。
α- 肽编码区：属于 β- 半乳糖苷酶的一部分，当外源基因插入到多克隆位点时，会导致 α- 肽编码区失活，利用这一特性，在含有 IPTG（异丙基 -β-D - 硫代半乳糖苷）和 X-Gal（5 - 溴 - 4 - 氯 - 3 - 吲哚 -β-D - 半乳糖苷）的培养基上，可通过蓝白斑筛选来区分重组克隆和非重组克隆。
使用方法
载体准备：用相应的限制性内切酶对 pGEM-3Zf (+) 载体进行酶切，使其线性化，以便插入外源 DNA 片段。
外源 DNA 片段制备：通过 PCR 扩增、酶切等方法获得目的外源 DNA 片段，并使其两端带有与线性化载体相匹配的粘性末端或平末端。
连接反应：使用 T4 DNA 连接酶将外源 DNA 片段与线性化的 pGEM-3Zf (+) 载体连接，形成重组质粒。
转化：将重组质粒转化到大肠杆菌感受态细胞中，如 DH5α、JM109 等，并在含有氨苄青霉素的培养基上进行筛选。
筛选与鉴定：通过蓝白斑筛选初步筛选出重组克隆，再进一步通过酶切鉴定、PCR 鉴定、DNA 测序等方法确认重组质粒中插入的外源 DNA 片段的正确性。
注意事项：该产品仅供科研使用，不得用于临床诊断及其他用途，产品说明书以到货说明书为准，网站说明书仅供参考！
热门标签：pGEM-3ZF(+),pGEM-3ZF(+)载体,,,,pGEM-3ZF(+)质粒
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