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pEF1a-hyPBase
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详细内容
pEF1a-hyPBase
中文名称:pEF1a-hyPBase
产品规格:2ug
产品货号:XY91250VT
运输:常温
保存:-20°C
有效期:两年
货期:一周
其他:多克隆位点经测序验证

载体类型:属于一种常用于基因工程的载体,一般归类为质粒载体,可用于将特定的基因片段导入到宿主细胞中。
启动子:含有 EF1a 启动子,该启动子来源于人类靶向延长因子 1α(EF1A)基因,其优势在于可在多数种类细胞中稳定表达,尤其在某些 CMV 启动子会发生沉默的细胞,如干细胞中能发挥良好的作用。
结构特点
多克隆位点(MCS):具有多克隆位点,便于外源基因的插入。外源基因插入到载体的 MCS 后,可由 EF1a 启动子启动外源基因片段表达。
抗性基因:通常会携带一些抗性基因,如氨苄青霉素抗性基因等,用于在基因工程操作中对含有该载体的细菌进行筛选和鉴定。例如,在含有 100µg/ml 氨苄抗生素的 LB 培养基中,含该载体的细菌可以增殖。
作用与应用
基因表达:可用于在各种哺乳动物细胞中,包括原代培养细胞,稳定表达外源基因。通过将目的基因插入到载体中,利用 EF1a 启动子的驱动作用,使得目的基因能够在宿主细胞中高效表达。
细胞筛选:借助其携带的筛选标记基因,如某些抗性基因,可以方便地筛选出成功导入了载体并稳定表达目的基因的细胞。比如使用 Hygromycin 筛选出稳定过表达目的基因的细胞。
使用方法
载体构建:首先需要将目的基因通过基因工程技术,如酶切、连接等方法,插入到 pEF1a-hyPBase 载体的多克隆位点区域,构建成重组质粒。
转化与转染:将构建好的重组质粒转化到大肠杆菌等原核细胞中进行扩增,然后再通过转染的方法,将重组质粒导入到哺乳动物宿主细胞中,如常用的 HEK293T 细胞等。
表达与检测:在宿主细胞中,EF1a 启动子启动目的基因的表达,之后可以通过各种方法,如 Western blot、荧光定量 PCR 等,对目的基因的表达情况进行检测和分析。
注意事项:该产品仅供科研使用,不得用于临床诊断及其他用途,产品说明书以到货说明书为准,网站说明书仅供参考!
热门标签:pEF1a-hyPBase,pEF1a-hyPBase载体,,,,pEF1a-hyPBase质粒















