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L201 pLVPTH2-tTR-KRAB-Cerulean-non_shRNA
价格：￥ 990
品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:43:11
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详细内容
L201 pLVPTH2-tTR-KRAB-Cerulean-non_shRNA
中文名称：L201 pLVPTH2-tTR-KRAB-Cerulean-non_shRNA
产品规格：2ug
产品货号：XY9080VT
运输：常温
保存：-20°C
有效期：两年
货期：一周
其他：多克隆位点经测序验证
结构与功能元件
pLVPTH2：是载体的基本骨架，可能包含一些关键的调控元件和序列，用于支持载体在细胞内的复制、转录等过程。
tTR-KRAB：tTR（tetracycline repressor）是四环素阻遏蛋白，KRAB（Krüppel-associated box）结构域具有转录抑制功能。tTR-KRAB 组合在一起，通常用于构建四环素调控的基因表达系统，在没有四环素或其类似物（如多西环素）存在时，tTR-KRAB 可以结合到特定的 DNA 序列上，抑制下游基因的表达；而当加入四环素或多西环素时，它们可以与 tTR 结合，使其从 DNA 上解离，从而解除对下游基因的抑制，实现对基因表达的可调控性。
Cerulean：是一种蓝色荧光蛋白，可作为报告基因，用于直观地监测载体是否成功导入细胞以及在细胞内的表达情况。通过荧光显微镜等设备，可以观察到 Cerulean 发出的蓝色荧光，从而判断载体的转染效率和基因表达情况。
scrambled-shRNA-Control：scrambled-shRNA 是一种乱序的短发夹 RNA，作为对照序列，它不具有特定的靶向基因沉默作用。在实验中，与针对特定基因的 shRNA 载体进行对比，用于排除非特异性干扰效应，确保实验结果的准确性，Control 表示该载体是作为对照使用的。
使用说明
收到质粒干粉后请先 5000rpm 离心 1min，再加入 20µl 无菌水溶解质粒，室温放置 1min。
从 - 80℃冰箱中取出相应的感受态，置于冰盒上解冻，并做好标记。
取 2µl 质粒加至 100µl 感受态中，冰浴 30min。
42℃热激 90s，再冰浴 2min。
加入 900µl 无抗的 LB 液体培养基，180rpm 震荡培养 45min。
6000rpm 离心 5min，仅留 100ul 上清混匀菌体沉淀。
混匀后的菌液加至对应抗性的 LB 平板上，倒入适量玻璃珠，涂匀液体。
将平板正向培养 1h，再倒置培养 12h-16h。
挑取单克隆菌落至对应抗性的 LB 液体培养基中，震荡培养 12h-16h，根据实验需要提取质粒。
注意事项
如果收到的是甘油菌种，请先四区划线，挑取单克隆培养。
如果第二天转化平板长的过多，请将质粒按比例稀释后再转化。
注意事项：该产品仅供科研使用，不得用于临床诊断及其他用途，产品说明书以到货说明书为准，网站说明书仅供参考！
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