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pET-28b-GST
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详细内容
pET-28b-GST
中文名称:pET-28b-GST
产品规格:2ug
产品货号:XY91372VT
运输:常温
保存:-20°C
有效期:两年
货期:一周
其他:多克隆位点经测序验证

载体结构
原核启动子:通常含有 T7 启动子,能被大肠杆菌中的 T7 RNA 聚合酶识别并启动转录,可高效启动目的基因的表达。
多克隆位点:具有多个独特的限制性内切酶酶切位点,如 NcoI、XhoI、BamHI 等,便于目的基因的插入,且能保证目的基因以正确的方向和阅读框插入载体。
GST 标签编码序列:即谷胱甘肽 S - 转移酶(GST)的编码基因,可与目的基因融合表达,使表达出的融合蛋白带有 GST 标签,大小一般为 26kD。
His 标签序列:pET-28b 载体本身通常含两个 His 标签,大小为 0.84KD,有利于蛋白的纯化,能纯化可溶性蛋白和包涵体蛋白,且标签小,对重组蛋白影响小。
终止子:位于基因编码区下游,可终止转录过程,保证 mRNA 的正确加工和稳定性。
功能特点
融合蛋白表达:GST 标签可以增强目的蛋白的可溶性,使一些原本在大肠杆菌中难溶性表达的蛋白能够以可溶形式表达,同时 GST 标签可屏蔽某些毒性蛋白对宿主细胞的毒性,有助于目的蛋白的表达和积累。
亲和纯化:利用 GST 标签与谷胱甘肽(GSH)之间的特异性亲和作用,可通过谷胱甘肽琼脂糖凝胶亲和层析柱对表达的融合蛋白进行纯化,操作简便、纯化效率高。同时,His 标签也可用于进一步的纯化或检测,增加了纯化的手段和灵活性。
蛋白检测:GST 标签可以用于蛋白的检测,如通过 Western blot 等方法,使用抗 GST 抗体来识别和检测融合蛋白的表达情况。此外,His 标签也可使用相应的抗体进行检测,双重标签使得蛋白的检测更加灵敏和准确。
应用领域
蛋白表达与纯化:在基础生物学研究中,常用于表达和纯化各种功能蛋白,如酶、受体、转录因子等,为蛋白结构与功能研究提供材料。
蛋白相互作用研究:通过将诱饵蛋白与 GST 融合表达,利用 GST pull-down 技术可以筛选和鉴定与诱饵蛋白相互作用的蛋白,有助于揭示蛋白质之间的相互作用网络和信号转导途径。
抗体生产:表达出的融合蛋白可作为抗原用于免疫动物,制备特异性抗体,为免疫检测和免疫治疗等研究提供工具。
注意事项:该产品仅供科研使用,不得用于临床诊断及其他用途,产品说明书以到货说明书为准,网站说明书仅供参考!
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