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pSilencer 2.1-U6 hygro载体
价格：￥ 1080
品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:43:11
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详细内容
pSilencer 2.1-U6 hygro载体
产品规格：2ug
产品货号：XY93490VT
基本信息
| 质粒类型: | RNAi载体 |
|---|---|
| 启动子: | Human U6 |
| 载体大小: | 4885bp (查看载体序列) |
| 5' 测序引物及序列: | T7-F: 5'-TAATACGACTCACTATAGGG-3', |
| 3' 测序引物及序列: | 2.0-R: 5'-AGGCGATTAAGTTGGGTA-3' |
| 载体抗性: | Ampicillin (氨苄青霉素) |
质粒图谱
结构特点
启动子：含有 U6 启动子，U6 启动子是 RNA 聚合酶 Ⅲ 依赖的启动子，能够高效地启动小 RNA 的转录，可确保插入的小干扰 RNA（siRNA）或短发夹 RNA（shRNA）在细胞内稳定表达。
抗性基因：携带潮霉素抗性基因（hph），使转染了该载体的细胞能够在含有潮霉素的培养基中生长，便于对成功摄取质粒并表达抗性基因的细胞进行筛选和维持稳定转染。
多克隆位点：具有 BamHI、HindIII 等多个限制性酶切位点，方便目的基因片段的插入，可用于构建编码特定 siRNA 或 shRNA 的表达载体。
其他元件：还包含氨苄青霉素抗性基因和大肠杆菌复制起点，以便在大肠杆菌中进行质粒的扩增和筛选，同时也含有一些必要的调控元件，如终止子等，保证基因表达的准确性和稳定性。
作用机制
转录：在细胞内，U6 启动子驱动插入的 DNA 序列转录生成小 RNA 分子，通常为短发夹结构（shRNA）。
加工与作用：转录出的 shRNA 被细胞内的 RNA 干扰机制识别并加工处理，形成具有活性的双链 siRNA。双链 siRNA 会结合到 RNA 诱导沉默复合体（RISC）中，然后通过碱基互补配对原则识别并结合靶 mRNA，引导 RISC 对靶 mRNA 进行切割或抑制其翻译过程，从而实现基因沉默的效果，降低靶基因的表达水平。
应用领域
基因功能研究：通过构建针对特定基因的 pSilencer 2.1-U6 hygro 载体，转染细胞后使目的基因沉默，观察细胞在形态、生理功能、增殖、凋亡等方面的变化，从而推断该基因的功能。例如在肿瘤研究中，可沉默与肿瘤发生、发展相关的基因，研究其对肿瘤细胞生长、侵袭和转移的影响。
疾病治疗研究：可用于探索基因治疗的方法，针对疾病相关的异常表达基因进行沉默，为治疗某些遗传性疾病、肿瘤、病毒感染等提供潜在的治疗策略。比如针对病毒感染，可设计靶向病毒基因的 siRNA 表达载体，抑制病毒基因的表达和病毒的复制。
药物研发：可以用于筛选和鉴定潜在的药物靶点。通过在细胞水平上沉默不同基因，观察其对药物敏感性的影响，找出与药物作用相关的关键基因，为药物研发提供依据。同时，也可用于评估药物对特定基因表达的影响，研究药物的作用机制。
使用方法
载体构建：根据目标基因的序列，设计并合成相应的 siRNA 或 shRNA 编码序列，通过限制性内切酶酶切和连接反应，将其插入到 pSilencer 2.1-U6 hygro 载体的多克隆位点处，构建成重组表达载体。
细胞转染：采用合适的转染方法，如脂质体转染法、电穿孔法等，将构建好的重组载体导入到目标细胞中。
筛选与鉴定：将转染后的细胞置于含有潮霉素的培养基中进行筛选，只有成功转染并表达潮霉素抗性基因的细胞才能存活。然后通过荧光定量 PCR、Western blot 等方法检测靶基因的表达水平，验证基因沉默的效果。
注意事项：该产品仅供科研使用，不得用于临床诊断及其他用途，产品说明书以到货说明书为准，网站说明书仅供参考！
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