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pSilencer 3.0-H1载体
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详细内容
pSilencer 3.0-H1载体
产品规格:2ug
产品货号:XY93491VT
基本信息
| 质粒类型: | RNAi载体 |
|---|---|
| 启动子: | H1 |
| 载体大小: | 2795 bp (查看载体序列) |
| 5' 测序引物及序列: | M13F(-40):GTTTTCCCAGTCACGAC |
| 载体抗性: | Ampicillin (氨苄青霉素) |
质粒图谱

类型:属于 RNAi 载体,主要用于在哺乳动物细胞中表达小发夹 RNA(shRNA),从而诱导靶基因的沉默。
抗性基因:携带氨苄青霉素抗性基因,使得含有该质粒的大肠杆菌能够在含有氨苄青霉素的培养基中生长,便于在细菌中进行质粒的筛选和扩增。
复制起点:具有高拷贝数的复制起点,如 ori,可在大肠杆菌中大量复制,获得足够数量的质粒用于实验。
结构元件
H1 启动子:是该载体的核心元件,属于 RNA 聚合酶 III 启动子,能够特异性地启动下游 shRNA 的转录,保证 shRNA 在哺乳动物细胞内的稳定表达。
多克隆位点:位于 H1 启动子下游,含有多种限制性酶切位点,如 BamHI 和 HindIII 等,方便将编码特定 shRNA 的 DNA 片段插入到载体中,实现对不同靶基因的 RNA 干扰实验。
M13 正向和反向引物结合位点:用于质粒的测序和鉴定,通过与 M13 通用引物结合,可对插入的 shRNA 序列以及载体的相关区域进行测序,确保插入序列的正确性和载体的完整性。
lac 操纵子相关元件:包括 lac operator、lac promoter 和 cap binding site 等,这些元件在大肠杆菌中可参与调控质粒的复制和表达,但在哺乳动物细胞中一般不发挥作用,主要是为了在细菌中进行质粒操作时提供便利。
作用机制
转录:载体进入哺乳动物细胞后,在 H1 启动子的驱动下,编码 shRNA 的 DNA 序列被转录成 shRNA 分子。
加工与作用:转录出的 shRNA 在细胞内被 Dicer 酶等加工处理,形成具有活性的双链小干扰 RNA(siRNA)。siRNA 会结合到 RNA 诱导沉默复合体(RISC)中,然后通过碱基互补配对原则识别并结合靶 mRNA,引导 RISC 对靶 mRNA 进行切割或抑制其翻译过程,从而实现基因沉默的效果,降低靶基因的表达水平。
应用领域
基因功能研究:通过构建针对特定基因的 pSilencer 3.0-H1 载体,转染细胞后使目的基因沉默,观察细胞在形态、生理功能、增殖、凋亡等方面的变化,进而推断该基因的功能。例如,在研究肿瘤相关基因时,可沉默肿瘤细胞中的癌基因或抑癌基因,观察对肿瘤细胞生长、侵袭和转移能力的影响。
疾病治疗研究:可用于探索基因治疗的策略,针对疾病相关的异常表达基因进行沉默,为治疗某些遗传性疾病、肿瘤、病毒感染等提供潜在的治疗方法。比如针对病毒性肝炎,可设计靶向肝炎病毒基因的 shRNA 表达载体,抑制病毒基因的表达和病毒的复制,从而达到治疗疾病的目的。
药物研发:在药物研发过程中,可利用 pSilencer 3.0-H1 载体筛选和鉴定潜在的药物靶点。通过在细胞水平上沉默不同基因,观察其对药物敏感性的影响,找出与药物作用相关的关键基因,为药物研发提供依据。同时,也可用于评估药物对特定基因表达的影响,研究药物的作用机制。
注意事项:该产品仅供科研使用,不得用于临床诊断及其他用途,产品说明书以到货说明书为准,网站说明书仅供参考!
热门标签:pSilencer,3.0-H1载体,pSilencer,3.0-H1,pSilencer,3.0-H1质粒















