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pTYB1载体
价格：￥ 1080
品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:43:11
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详细内容
pTYB1载体
产品规格：2ug
产品货号：XY93834VT
基本信息
| 质粒类型: | 大肠杆菌表达载体 |
|---|---|
| 载体大小: | 7477 bp (查看载体序列) |
| 5' 测序引物: | T7 |
| 载体标签: | Intein |
| 载体抗性: | Ampicillin (氨苄青霉素) |
| 备注: | This C-terminal fusion vector is designed for the in-ｆframe insertion of a target gene into a polylinker upstream of an intein tag (the Sce VMA intein/chitin binding domain, 55 kDa). This results in the fusion of the C-terminus of the target protein to the N-terminus of the intein tag. Thiol-induced self-cleavage of the intein releases the target protein from the chitin-bound intein tag, resulting in a single column purification of the target protein. |
质粒图谱
工作原理
表达调控：T7 启动子可被 T7 RNA 聚合酶识别并启动转录，而在没有诱导剂时，Lac repressor 会结合到 lac operator 上，抑制 T7 启动子的基础表达。当加入诱导剂 IPTG 时，IPTG 与 Lac repressor 结合，使其从 lac operator 上脱离，从而启动目的基因的表达。
蛋白纯化：目标基因与 Intein 和 CBD 形成融合蛋白，表达后的融合蛋白可通过 CBD 与几丁质树脂结合，然后利用 Intein 的自切割活性，在特定条件下（如加入硫醇试剂），Intein 会发生自切割，将目标蛋白从树脂上释放下来，实现目标蛋白的一步纯化。
应用领域
蛋白表达与纯化：广泛应用于各种蛋白的表达与纯化，如人 Canstatin 蛋白的表达纯化。通过将目标蛋白基因克隆到 pTYB1 载体中，在大肠杆菌中诱导表达，然后利用内含肽和几丁质结合域的特性进行纯化，可获得高纯度的目标蛋白。
蛋白质相互作用研究：利用 pTYB1 载体表达带有标签的蛋白，通过亲和纯化获得蛋白复合物，进而研究蛋白质之间的相互作用。
使用注意事项
宿主菌株选择：需要使用含有 T7 RNA 聚合酶基因的大肠杆菌菌株，如 C2566、C2833 或 BL21 (DE3) 等，以保证目的基因能够在 T7 启动子的驱动下进行表达。
诱导条件优化：不同的目标蛋白在表达时可能需要优化诱导剂 IPTG 的浓度、诱导时间和诱导温度等条件，以获得最佳的表达量和蛋白活性。
蛋白折叠与溶解性：在大肠杆菌中表达的蛋白可能会出现折叠错误或形成包涵体的情况。对于一些难以表达或易形成包涵体的蛋白，可能需要尝试不同的表达策略，如降低诱导温度、调整诱导时间、共表达分子伴侣等，以提高蛋白的可溶性和活性。
注意事项：该产品仅供科研使用，不得用于临床诊断及其他用途，产品说明书以到货说明书为准，网站说明书仅供参考！
热门标签：pTYB1载体,pTYB1质粒,pTYB1
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