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pTYB4载体
价格：￥ 1080
品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:43:11
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详细内容
pTYB4载体
产品规格：2ug
产品货号：XY93838VT
基本信息
| 质粒类型: | 大肠杆菌表达载体 |
|---|---|
| 载体大小: | 7474 bp (查看载体序列) |
| 5' 测序引物: | T7 |
| 备注: | This C-terminal fusion vector is designed for the in-ｆframe insertion of a target gene into a polylinker upstream of an intein tag (the Sce VMA intein/chitin binding domain, 55 kDa). This results in the fusion of the C-terminus of the target protein to the N-terminus of the intein tag. Thiol-induced self-cleavage of the intein releases the target protein from the chitin-bound intein tag, resulting in a single column purification of the target protein. |
质粒图谱
结构特点
内含肽（Intein）：来源于酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）的 VMA1 基因，长度为 454 个氨基酸，是一种经过改造的剪接缺陷型突变体，仅在巯基化合物或羟胺存在的条件下发生 N 端切割，C 端的切割和剪接活性已被消除。
几丁质结合域（CBD）：位于内含肽的某个环区，由 56 个氨基酸组成，可与几丁质树脂特异性结合，用于融合蛋白的亲和纯化，且不影响内含肽的切割活性。
多克隆位点（MCS）：位于内含肽的上游，含有多个限制性内切酶识别位点，可供目的基因插入，保证目的基因与内含肽和 CBD 形成正确的阅读框，实现融合表达。
其他元件：如 T7 终止子，可有效终止转录过程，防止转录通读；还有编码氨苄青霉素抗性的基因，用于筛选含有重组质粒的大肠杆菌菌株。
工作原理
蛋白表达：将构建好的 pTYB4 重组载体转化到大肠杆菌中，在 T7 启动子的驱动下，目的基因与内含肽、CBD 一起转录和翻译，产生融合蛋白。
蛋白纯化：利用 CBD 与几丁质树脂的特异性结合作用，将融合蛋白结合到几丁质亲和层析柱上，然后加入含有巯基的化学物质，如 DTT 等，诱导内含肽发生自剪切反应，使目的蛋白从融合蛋白中释放出来，通过洗脱液将目的蛋白从层析柱上洗脱下来，实现目的蛋白的纯化。
应用领域
蛋白表达与纯化：可实现目的蛋白的高效表达与一步纯化，尤其适用于表达一些难以纯化的蛋白，如膜蛋白、具有复杂结构的蛋白等，能获得高纯度的目的蛋白。
蛋白质结构与功能研究：通过在目的蛋白的 C 端融合内含肽和 CBD 标签，不影响目的蛋白的结构和功能，可用于研究蛋白质的折叠、相互作用、酶活性等生物学特性，也有助于蛋白质晶体结构的解析。
多肽药物开发：在多肽药物的生产中，pTYB4 载体可以实现多肽的高效表达和纯化，获得具有生物活性的多肽，为多肽药物的研发和生产提供支持。
注意事项：该产品仅供科研使用，不得用于临床诊断及其他用途，产品说明书以到货说明书为准，网站说明书仅供参考！
热门标签：pTYB4载体,pTYB4质粒,pTYB4
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