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pmCherry-N1载体
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详细内容
pmCherry-N1载体
产品规格:2ug
产品货号:XY92560VT
基本信息
| 质粒类型: | 荧光蛋白报告载体 |
|---|---|
| 启动子: | CMV |
| 克隆方法: | 多克隆位点,限制性内切酶 |
| 载体大小: | 4722 bp (查看载体序列) |
| 5' 测序引物及序列: | CMV-F: CGCAAATGGGCGGTAGGCGTG |
| 3' 测序引物及序列: | mCherry-R: TTGGTCACCTTCAGCTTGG |
| 载体标签: | mCherry |
| 载体抗性: | Kanamycin (卡那霉素) |
| 筛选标记: | Neomycin |
质粒图谱

结构特点
启动子:CMV 启动子,具有较强的活性,可驱动目的基因在多种哺乳动物细胞中高效表达。
多克隆位点:位于 mCherry 基因的上游,含有多个独特的限制性酶切位点,如 Xho I、EcoR I 等,方便外源基因的插入。
荧光标记蛋白:mCherry 是一种从四聚体盘状珊瑚红色荧光蛋白 DsRed 衍生而来的突变型荧光蛋白,其激发和发射最大值分别为 587nm 和 610nm,可通过荧光显微镜或流式细胞仪对表达该蛋白的细胞进行观察和分析。
复制子:包含 pUC ori 和 f1 ori,其中 pUC ori 用于在大肠杆菌中进行高拷贝复制,f1 ori 则可用于产生单链 DNA。
终止子:SV40 poly (A) signal,可确保转录的正确终止和 mRNA 的稳定。
应用领域
蛋白表达与定位研究:将目的基因与 mCherry 融合表达,可通过荧光显微镜观察融合蛋白在细胞内的定位,了解目的蛋白的分布情况。
细胞标记与追踪:利用 pmCherry-N1 载体转染细胞,使细胞表达红色荧光蛋白,可对细胞进行标记和追踪,研究细胞的增殖、分化、迁移等生物学行为。
基因功能研究:通过构建携带特定基因的 pmCherry-N1 载体,转染细胞后观察基因过表达或干扰对细胞生理功能的影响,如细胞生长、凋亡、信号通路激活等。
使用方法
载体构建:选择合适的限制性内切酶对 pmCherry-N1 载体和目的基因片段进行双酶切,然后通过 DNA 连接酶将目的基因连接到载体的多克隆位点上,构建成重组表达载体。
细胞转染:将构建好的重组载体采用脂质体转染法、电穿孔法等方法转染到目标哺乳动物细胞中。
表达检测:转染后一段时间,可通过荧光显微镜观察细胞内红色荧光的表达情况,初步判断目的基因是否成功表达;也可通过 Western blot 等方法进一步检测目的蛋白的表达水平。
注意事项:该产品仅供科研使用,不得用于临床诊断及其他用途,产品说明书以到货说明书为准,网站说明书仅供参考!
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