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细胞质染色试剂 Calcein, AM
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详细内容
细胞质染色试剂 Calcein, AM
产品货号:XY9-441936
产品规格及价格:100UL/700元
产品简介:
细胞质染色试剂Calcein-AM是绿色荧光标记的细胞质探针,具有490 / 515nm的最大激发/发射波长。
Calcein-AM是一种可对活细胞进行荧光标记的细胞染色试剂,Calcein-AM由于在Calcein的基础上加强了疏水性,因此能够轻易穿透活细胞膜。当其进入到细胞质后,酯酶会将其水解为Calcein留在细胞内,发出强绿色荧光。与其它同类试剂(如BCECF-AM和Carboxy-fluorescein diacetate)相比,Calcein-AM是最适合作为荧光探针去染活细胞的,因为它的细胞毒性很低,而且不会抑制任何的细胞功能,如增殖和淋巴球的趋化性。 Calcein的激发和发射波长分别为490 nm和515 nm。Calcein -AM仅对活细胞染色。
Calcein, AM和PI经常被结合用来作为活细胞和死细胞的双重染色。
可以提供细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种检测试剂盒产品。
可以为您提供各种颜色的M系列、N系列、L系列、E系列、G系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品,以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。
可以提供动物、植物、微生物、酵母、水产、家禽、兽类、土壤等样本的各种生化指标检测的数百种试剂盒产品。
产品应用:
荧光显微镜/激光共聚焦

使用方法:
1.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体收集至管底,避免开盖时液体洒落。
2.染色液为 DMSO 溶液,冬季气温较低时在室温时为凝固状态,极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解,吸头也需要放在培养箱预热,否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
3.使用前,先将本品取出回温至室温,并对其进行简短离心使 DMSO 溶液集中于管底。
4.细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
5.标记的条件因细胞种类而异,根据不同样本的实际染色结果做相应调整,在每次实验前,请先根据不同的实验要求、细胞类型、细胞的膜通透性等进行优化,确定最佳条件。
6.以下方法仅供参考,根据需要使用,或者参考文献的使用方法。
7.染色后立即进行分析。
8.本染色液可用于细胞涂片、细胞的检测。
9.由于 Calcein-AM 的工作液稳定性比较差,染色工作液必须现配现用,并且在当天用完。
10.Calcein-AM 对湿度非常敏感,若是 Calcein-AM 溶液每次取完需要量后,必须紧紧密封盖子。建议根据单次用量,分装密封保存。不可使用含水的吸头。
11.试剂 A 母液请拧紧螺旋盖,避免受潮失效。
12.参考:可以使用以下方法来优化得到荧光染料的最佳工作浓度。1) 用 0.1%皂素或者 0.1-0.5%孵育细胞 10min,或者用 70%乙醇孵育细胞 30min,从而制备死细胞;2) 用 15000 倍-1500 倍稀释(试剂盒中的母液)的 PI 溶液进行死细胞染色,以得到仅仅对细胞核染色,而不会对细胞质染色的最佳工作浓度。3) 用1000 倍-100 倍稀释(试剂盒中的母液)的 Calcein-AM 进行死细胞染色,以得到不会对细胞质染色的最佳工作浓度。然后用此浓度进行活细胞染色,去观察是否活细胞能被染色。
1. 染色工作液的配制:
根据样品数按下列比例配制染色工作液。
用 HBSS 缓冲液或无血清培养基将染色液 1000 倍稀释,充分混匀,即成染色工作液 A。
2. 收集样本细胞。
3. 用 PBS 洗涤细胞两次。
4. 用 200ul 染色工作液将细胞重悬。
5. 在室温或 37℃避光孵育 15-20 分钟。
6. 用 PBS 洗涤细胞。
7. 用适量 PBS 重悬细胞。
8. 用荧光显微镜或流式细胞仪检测结果。最大激发为 490nm,最大发射波长为 515nm 和 617nm。
结果分析 :
荧光显微镜下,使用 488nm 波长激发,活细胞为黄绿色
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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