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外泌体染色(exosomes)试剂盒（含离心管）-红色荧光
价格：￥ 50T/2100元
品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/15 11:03:04
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详细内容
外泌体染色(exosomes)试剂盒（含离心管）-红色荧光
产品货号：XY9-39864
产品规格及价格：50T/2100元
产品简介：
荧光染料PKH26是一种可对外泌体进行荧光标记的新型染料，可以通过与外泌体膜结构的脂质分子结合而标记外泌体。
BBcellProbe® PKH26荧光背景低，脂溶性高，能够轻易穿透外泌体膜，有着强而稳定的绿色荧光。经PKH26标记的外泌体可用于体外和体内研究，且具有不会使邻近细胞染色的功能。
PKH26标记外泌体的荧光非常均一，阳性标记率达98%以上，标记外泌体形态良好。
PKH26标记细胞呈绿色荧光，荧光波长：λex=551 nm, λem=567 nm。
除了本橙红色荧光染色试剂盒，还可以提供绿色、深红色等外泌体染色试剂盒（相关产品：BB-39863）。
使用方法：
1. 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
2. 配制的 PKH26 母液极易水解，建议分装保存，分装后用封口膜密封管口，再用锡箔纸包裹，和干燥剂一起用塑料袋密封，≦-20℃冷冻保存。
3. PKH26 工作液应现配现用，不能提前配制，因为 PKH26 吸水会分解，影响染色效果。
4. PKH26 易被水解，在水溶液中会很快变质。母液请在使用过程中避免接触水。工作液在标记细胞的过程中和水接触是在许可的时间范围内的。
5. PKH26 溶解液在 4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内，可以37℃水浴片刻至全部融解后使用。
6. 不同的外泌体种类标记后可以示踪的时间差异较大，请根据实际情况或参考文献进行检测。
试剂配制：
从冰箱中取出 PKH26 试剂，静置几分钟至室温，或者 37℃水浴片刻后，离心盛放 PKH26 的管子，开盖前请务必离心几分钟让试剂充分落入管底后才能开盖。
外泌体染色：
1. 根据需要检测的样品数，用稀释液将探针 10 倍稀释，再用合适的溶液（如：无血清培养
基，HBSS 或 PBS）20 倍稀释，配制成染色工作液。
2. 将制备好的待染色外泌体样本用 100 µl 染色工作液重悬。
3. 在室温或 37℃避光孵育 5-30 分钟。
染色样品预处理：
1. 将样品在 4℃条件下，3000×g 离心 15 分钟。弃沉淀，收集上清。
2. 小心将上清移入另一干净离心管中。
3. 将样品在 4℃条件下，10000×g 离心 20 分钟。弃沉淀，收集上清。
4. 小心将上清移入另一干净离心管中。
5. 进行下列外泌体纯化步骤操作。
清洗外泌体纯化离心管：
1. 用缓冲液或纯水进行预清洗。
2. 离心管中的过滤膜一旦润湿后应避免变干。如果在预清洗后不是立即使用，则让液体保留在滤膜上，直到使用。
外泌体纯化：
1. 将外泌体纯化离心管内管插入所提供的一个微量离心管中。
2. 向内管中加入过 100 ul 的待纯化外泌体样本，并盖上盖子。
3. 将盖好盖子的外泌体纯化离心管放入离心转子中，让盖子的连接带朝着转子的中央；用一个类似的离心管平衡。
4. 以 5000-8000 ×g 离心约 10-15 分钟。离心至大约剩余 20ul-30ul 液体。
5. 加入 70ul PBS 缓冲液。
6. 以 5000-8000 ×g 离心约 1-15 分钟。离心至大约剩余 20ul-50ul 液体。
7. 离心结束后将整个离心管从离心机中取出，取出内管。
8. 为了回收纯化后的外泌体，将内管倒过来插在另一个干净的微量离心管中。放在离心机中，让打开的盖子朝着转子的中央；用一个类似的离心管进行平衡。
9. 以 1000 x g 离心 2 分钟，使纯化后的外泌体样本从纯化内管转移到收集管中。
10. 吸取收集管中的液体，即得到外泌体样品纯品。
11. 用纯水或缓冲液洗涤内管和收集管，继续纯化下一个样品。
外泌体纯化离心管清洗和保存：
1. 使用后用水冲洗干净；
2. 内管加入超纯水 500µl，5000g 离心 5 分钟；
3. 吸净内管中的水，加入 500µl 0.1M NaOH，5000g 离心 20 分钟；
4. 用 0.1M NaOH 浸泡 24 小时；
5. 用水冲洗干净；
6. 用无菌水浸泡 2-8℃保存。
7. 外管用自来水洗净后，用超纯水冲洗干净，晾干。
常见问题分析：
1. 外泌体纯化管内管膜会因为离心时间过长而变干么？
不会，因为内管有死体积，总会有溶液残留在内管中。死体积大约 10-20ul。
2. 可以重复使用过滤管么？
可以重复使用。如果使用、清洗、保存得当，可以反复使用多次。但是超过 8 次重复使用后过滤膜有破损风险，注意使用过程中尽量避免尖锐物品戳到膜。离心力不要过大。
3. 外泌体在纯化时出现了沉淀，如何改进？
如果过滤过快或者过度浓缩都有可能引起沉淀。如果样品的外泌体浓度很高，建议降低最终的外泌体浓度，保留更多的液体。
对于因过滤速度敏感而导致的沉淀，建议的改进方法是：
1）离心力降低 30%-50%
2）在过滤过程中取出过滤管，用枪头反复吹吸几次。
4. 有时候用外泌体纯化离心管连水都离不下来，可能是什么原因？
如果出现这种情况，可能时过滤膜的孔被堵住。请先用 0.1M NaOH 清洗再离心。用缓冲液或纯水再次清洗后甩干。清洗后的滤膜应立即使用，如暂时不用，请保持润湿状态，避免重新干燥。
5. 说明书中推荐在室温下进行离心，考虑到外泌体的稳定性，是否可以在 4℃进行离心？
可以，但是低温可能会增加外泌体样品的粘性，导致流速减慢，建议可将离心时间延长。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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