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外泌体蛋白提取试剂盒
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详细内容
外泌体蛋白提取试剂盒
产品货号:XY9-3961
产品规格及价格:50T/700元;100T/1100元
产品简介:
外泌体蛋白提取试剂盒提供全套试剂,适用于从各种方法得到的外泌体样品中提取总蛋白。
本试剂盒含有的独特配方能够有效溶解外泌体膜组份,本试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物,阻止了蛋白酶对蛋白的降解,为提取高纯度的蛋白提供了保证。
本试剂盒提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫沉淀、ELISA、酶活性测定等下游蛋白研究实验。
本试剂盒提取的蛋白为具有天然蛋白构象的活性蛋白,下游应用范围广,提取液裂解细胞的能力较温和,需要根据实际样本情况优化裂解时间。
本试剂盒中不含有EDTA,与金属螯和层析等下游应用兼容。
本试剂盒提取的蛋白样本含有高浓度的盐成分,不可直接用于2D电泳,如下游实验需要直接用于等电聚焦、双向电泳,请使用其他货号的试剂盒。也可以将样品除盐后再用于2D电泳,用脱盐柱脱盐处理。
可以提供针对动物细胞、组织、植物、真菌、酵母、微生物、藻类、液体、土壤等各种不同样本的蛋白提取试剂盒。
可以提供针对细胞膜、核、胞质、线粒体、溶酶体、高尔基体、内质网、外泌体等细胞不同部位的蛋白提取试剂盒。
可以提供针对下游实验不同应用的试剂盒,例如用于Western Blotting和双向电泳等不同下游应用的试剂盒;含去垢剂成分和不含去污剂成分的蛋白提取试剂盒;专用于蛋白质谱检测、Pull-down实验的试剂盒等总计300多种蛋白提取试剂盒供选择使用。
产品应用:
外泌体研究

使用方法:
1.旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
2.蛋白酶抑制剂在 2-8℃时是固体状态,从冰箱取出后恢复至室温或 37℃短时间水浴,变成液体状态后离心至管底部再开盖。
3.实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
4.蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀,不影响使用,溶解后正常使用。
5.如果试剂盒不能短时间内用完,蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。
6.可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
7.下游实验如果是进行特定蛋白酶的酶活性检测,提取液可以不加蛋白酶抑制剂,注意提取过程保持低温操作,缩短离心时间。
1. 提取液准备:
每 500ul 冷的蛋白提取液中加入 2ul 蛋白酶抑制剂混合物,混匀后置冰上备用。
2. 每 50ul 外泌体样品中加入 50ul 冷的蛋白提取液,吹打混匀后,在 4℃条件下振荡 20-30 分钟。
3. 在 4℃,12000×g 条件下离心 10 分钟。
4. 将上清吸入另一预冷的干净离心管,即可得到外泌体总蛋白。
5. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。
常见问题分析:
1.蛋白浓度低?
外泌体蛋白含量较少,需要较多的外泌体样本才能得到足够的蛋白样品用于下游实验。在条件允许的情况下,尽可能加大外泌体提取时的培养基上清、血清、体液等样本的上样量。
不同细胞培养上清提取得到的外泌体蛋白量差异较大,大多数细胞的参考值为 0.1ug 蛋白/106 细胞。
处理部分外泌体样本时可能没有裂解完全,导致蛋白浓度低。只要适当延长试剂 A 的处理时间即可。在持续振荡的条件下处理,没有振荡器也可间隔几分钟用吸头吹打混匀。
2.用什么方法定量蛋白?
建议用 BCA 法。不适合用 Bradford 法,因为试剂 A 中含有干扰 Bradford 法的组份,导致定量不准。如果已经进行过透析处理或者用脱盐柱改换过缓冲体系,则可以用 Bradford 法定量。
3.提取的蛋白具有活性吗?
本试剂盒不含有离子型去垢剂组份,不破坏蛋白的结构,没有对蛋白质之间原有的相互作用的破坏,蛋白均保持其天然构象和活性。
4.外泌体 WB 标志蛋白用什么?
在进行 WB 检测时,通常检测外泌体标志蛋白为 CD63 、CD9 、CD81 、TSG101 、ALIX、HSP70 等。
5.进行外泌体 WB 鉴定时有什么内参蛋白可供选择?
没有,该检测属于定性检测。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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