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pBM2240
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详细内容
pBM2240
中文名称:pBM2240
产品规格:2ug
产品货号:XY9543VT
运输:常温
保存:-20°C
有效期:两年
货期:一周
其他:多克隆位点经测序验证

结构特点
复制起点:包含 pmb1 ori 和 cen6/ars4,其中 pmb1 ori 可在大肠杆菌中启动复制,使载体在大肠杆菌中实现高拷贝复制;cen6/ars4 则用于在酵母菌中启动复制,保证载体在酵母细胞中的稳定存在和复制。
抗性标记:具有氨苄青霉素抗性基因(ampr),可用于在含有氨苄青霉素的培养基中筛选含有该载体的大肠杆菌;同时含有 ura3 基因,可用于筛选在酵母细胞中成功转化的细胞。
多克隆位点(MCS):位于 t7 promoter 和 t3 promoter 之间,便于外源基因的插入,且两侧的酶切位点便于对插入片段进行操作和分析。
其他元件:还包含 f1 ori、lacz 基因、t7 启动子、t3 启动子等,f1 ori 可用于产生单链 DNA,lacz 基因可用于蓝白斑筛选等。
功能作用
基因克隆:可用于克隆难以通过常规方法克隆的酵母基因,通过与 λ 克隆感兴趣的基因和用 EcoRI/XhoI 双酶切线性化的载体共转化酿酒酵母,然后筛选 Ura + 菌落,再测试其对突变表型的互补作用,从而实现酵母基因的克隆。
基因表达:t7 启动子和 t3 启动子可启动插入的外源基因在宿主细胞中的表达,便于对目的基因的功能进行研究。
应用领域
酵母遗传学研究:常用于酵母基因的克隆、功能分析和基因调控研究等,帮助研究人员深入了解酵母细胞的生物学过程和分子机制。
蛋白表达与生产:可将目的基因插入载体中,在大肠杆菌或酵母细胞中进行表达,用于生产重组蛋白,为蛋白质结构与功能研究、药物研发等提供材料。
使用注意事项
酶切位点选择:在进行外源基因插入时,需选择合适的酶切位点,避免破坏载体的关键元件,同时要注意插入片段的方向和读码框。
转化效率:不同宿主细胞的转化效率可能有所差异,需优化转化条件,如感受态细胞的制备、转化方法和筛选条件等,以提高转化成功率。
基因表达优化:若用于基因表达,需对启动子、核糖体结合位点等元件进行优化,以提高目的基因的表达水平,同时要注意表达产物对宿主细胞的影响。
注意事项:该产品仅供科研使用,不得用于临床诊断及其他用途,产品说明书以到货说明书为准,网站说明书仅供参考!
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