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MaxEndoFree无内毒素质粒小提试剂盒

价格：￥ 1010

品牌名称：$brandModel.Title型号：原产地：中国大陆更新时间：2026/10/15 11:01:32

产品摘要：MaxEndoFree无内毒素质粒小提试剂盒用于无内毒素质粒 DNA 的小量制备。菌体经碱裂解、高盐、低 pH 处理，质粒可从菌体中释放出来，并特异、高效地被离心柱硅胶膜吸附。再经内毒素清除液清洗，可将绝大多数菌体内毒素清除干净，然后通过清洗液的清洗可去除蛋白及其他杂质，在低盐、高 pH 条件下洗脱得到高纯度无内毒素的质粒 DNA。

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MaxEndoFree 无内毒素质粒小提试剂盒

E n d o F r e e M i n i P l a s m i d P u r i f i c a t i o n K i t

( 离心柱型 )

产品及特点：

本试剂盒适用于无内毒素质粒 DNA 的小量制备。菌体经碱裂解、高盐、低 pH 处理，质粒可从菌体中释放出来，并特异、高效地被离心柱硅胶膜吸附。再经内毒素清除液清洗，可将绝大多数菌体内毒素清除干净，然后通过清洗液的清洗可去除蛋白及其他杂质，在低盐、高 pH 条件下洗脱得到高纯度无内毒素的质粒 DNA。使用本试剂盒可从 1 - 5 ml 过夜培养的菌液中纯化得到高达 20 µg 的无内毒素质粒 DNA，所得质粒除可用于常规分子生物学实验外，还适合细胞株的转染实验。它具有下列特点：
1. 快捷、高效：操作简便，得率高，节约时间；
2. 纯度高：沉淀致密，去杂干净；
3. 内毒素去除简单：柱上去除内毒素，方便快速，清除干净。

产品货号：XY910107

产品规格：50T/350元、100T/590元、200T/1010元

成分规格：

（注意：使用前将全部 RNase A 溶液加到 Buffer S1 中混合均匀，2 - 8℃保存;按要求在 Buffer W2 中加入无水乙醇）
保存条件
在室温(15-25℃)干燥条件下，可保存 12 个月；更长时间的保存可置于 2-8℃。若溶液产生沉淀，应在使用前置于 37℃下溶解沉淀。加入 RNase A 后的 Buffer S1 应置于 2- 8℃保存，可稳定保存 6 个月。
使用方法
柱平衡：向吸附柱中（吸附柱放入收集管中）加入 400 µl 的平衡液 BL，12,000 rpm (-13,400×g ) 离心 1 min，弃收集管中滤液，将吸附柱重新放回收集管中。（请使用当天处理过的柱子）
1. 取 1 - 5 ml 过夜培养的菌液，室温 12,000 rpm 离心 1 min，尽量将上清去除干净。
（注意：根据菌液的浓度决定取液量，浓度高时取 1.5 ml 菌液离心即可，浓度低时可多收集一次）
2. 加入 250 µl Buffer S1，旋涡震荡或用移液器充分吹打使菌体重悬均匀。
（注意：菌体沉淀一定要悬浮均匀，如有未悬浮的菌块会影响裂解，导致提取的质粒浓度及纯度降低）
3. 加入 250 µl Buffer S2，温和颠倒混匀使菌体完全裂解，直到溶液变成清亮、粘稠。
（注意：不可剧烈震荡，以免造成基因组 DNA 片段的污染，所用时间不要超过 5 min，以免质粒受到破坏）
4. 加入 250 µl Buffer S4，立即颠倒混匀 6-8 次，12,000 rpm 离心 10 min，小心将上清液转移到一干净的离心管中，加入 250 µl 异丙醇混匀。
（注意：Buffer S4 加入后应立即混合，避免产生局部沉淀）
5. 将混合液转入离心吸附柱中，12,000 rpm 离心 30 sec，弃收集管中滤液。
（注意：吸附柱的最大容量为 750 µl，分两次转入）
6. 向吸附柱中加入 250 µl ToxinOut Buffer，室温静置 5 min，12,000 rpm 离心 1 min，弃收集管中滤液。
7. 加入 600 µl Buffer W2，室温 12,000 rpm 离心 30 sec，弃收集管中滤液。
（注意：Buffer W2 为浓缩液，按要求加入无水乙醇，用后应立即盖紧瓶盖，以防酒精挥发）
8. 加入 500 µl Buffer W2，室温 12,000 rpm 离心 30 sec，弃收集管中滤液。
9. 干燥。将离心吸附柱于 12,000 rpm 离心 2 min，甩干残留漂洗液。
（注意：此步不能省略，否则残留乙醇会影响质粒的后续使用）
10. 将离心吸附柱置于一个新的 1.5 ml 塑料离心管（自备）中，加入 50 - 100 µl 的洗脱液 Buffer EB，室温放置 2 min。12,000 rpm 离心 1 min，离心管底溶液即质粒 DNA。
（注意：为增加洗脱效率，可将洗脱液在 60℃预热。如需使用去离子水洗脱，可用 NaOH 调整其 pH 值在 7.0 - 8.5 之间，为了增加质粒回收率，可将得到的溶液重新加入到离心管中，室温放置 2 min，再次离心收集）
低拷贝或大质粒（>10 kb）提取
如果所提质粒为低拷贝质粒或大于 10 kb 的大质粒，应加大菌体使用量，使用 5 - 10 ml 过夜培养物，同时按照比例增加 Buffer S1、S2、S3 的用量，洗脱液 Buffer EB 应在 60℃水浴预热，在吸附和洗脱时可以适当延长时间，以增加提取效率。其它步骤相同。

注意事项

●细菌培养时间一般为 12-16 小时，如接种量大则应减少培养时间，过度培养会降低质粒质量甚至导致质粒 DNA 突变；

●每次使用时都要注意 Buffer S2 和 S4 是否形成沉淀，如有沉淀 37℃溶解后再用；

●注意溶液 S1，S2 和 S4 的用量比例，若细菌量增大，需按比例放大这些溶液的使用量；

●质粒的产量跟细菌量、质粒拷贝数、质粒大小和操作规范程度密切相关。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。

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