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做ELISA标准曲线时需求关键注意的细节问题

点击次数:4754 发布时间:2017/12/23 18:04:20

做ELISA标准曲线时需求关键注意的细节问题

用于免疫检测的所谓“标准曲线"其实称为拟合曲线比较适合。ELISA标准曲线做的好与坏会直接影响到实验的效果,甚至是关系到实验的胜败。在今日的文章中,上海抚生技术员为您总结出:做ELISA标准曲线时需求要点留心的细节问题,一起来看下。


1.设置标准曲线样品的标准浓度规模要有一个比较大的跨度,并且要能包括你所要检测实验样品的浓度,即样品elisa试剂盒的浓度要在标准曲线浓度规模之内,包括上限和下限。而关于呈S型的标准曲线,尽量要使实验样品的浓度在中间斜度最陡段,即曲线几乎成直线的规模内。


2.检测标准样品时,应按浓度递加次第进行,以减少高浓度对低浓度的影响,进步准确性。


3.标准曲线的样品数一般为7个点,但至少要保证有5个点。


4.做出的标准曲线相关系数因实验要求不同而有所改变,但一般来说,相关系数R至少要大于0.98,关于有些实验,至少要0.99甚至是0.999。


5.样品的浓度等目标是根据标准曲线计算出来的,所以首要要把ELISA试剂盒做标准曲线看作是比做正式实验还要重要的一件事,不然后边的实验效果无从谈起。


6.最好选用倍比稀释法制作标准曲线中的标准样品浓度,这样就可以保证标准样品的浓度不会呈现较大的违背。

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