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小鼠基质金属蛋白酶4(MMP-4）ELISA试剂盒使用说明书
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上传时间：2017/3/13 10:03:34
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上 传 者：上海邦景实业有限公司
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小鼠基质金属蛋白酶4(MMP-4）elisa试剂盒性能：
1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.92以上。
2.批内与批间应分别小于9%和15%
检测范围：
3pg/ml -120pg/ml
保存条件及有效期：
1.试剂盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6个月
操作步骤
1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
320µg/L 5 号标准品 150µl 的原倍标准品加入 150µl 标准品稀释液
160µg/L 4 号标准品 150µl 的 5 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
80µg/L 3 号标准品 150µl 的 4 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
40µg/L 2 号标准品 150µl 的 3 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
20µg/L 1 号标准品 150µl 的 2 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50µl，待测样品孔中先加样品稀释液 40µl，然后再加待测样品 10µl（样品最终稀释度为 5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4. 配液：将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此
重复 5 次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂 50µl，空白孔除外。
7. 温育：操作同 3。
8. 洗涤：操作同 5。
9. 显色：每孔先加入显色剂 A50µl，再加入显色剂 B50µl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10 分钟.
10. 终止：每孔加终止液 50µl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。 测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。
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