亿迅生物-Poly A聚合酶供应


描述：本 E. coli Poly(A) Polymerase 为高效加 A 聚合酶，该酶以RNA为模板在RNA的3′末端加入20~200个A碱基。可应用于增强 mRNA 的稳定性，及 microRNA 加 A 尾，为cDNA 合成提供 oligo-dT 引物结合位点等。该酶以单链 RNA 作为引物，ATP 作为底物进行聚合反应。


活性定义：
在 37℃、pH7.9 的条件下，以 ATP 为底物，10 分钟内把1 nmol 的 AMP 聚合到 RNA 上所需要的酶量定义为 1 个活性单位（U）。


应用：
 RNA 3＇ 标记
 microRNA 加 A 尾，为 cDNA 合成提供 oligo-dT 引物结
合位点
 增强 RNA 稳定性


储存：
-20°C 可保存 2 年。

热失活条件: 
65°C 20 min 


操作方法：
1. 按以下组分配制反应体系
E. coli Poly(A) Polymerase(5U/μl) 1 μl
10×EPAP Reaction Buffer 2 μl
10 mM ATP 2 μl
25 mM MnCl2 2 μl
RNA 0.5~10 μg
ddH2O Up to 20 μl

2. 混合均匀后，37°C 反应 1 小时。即可用于后续实验。
注：不同的实验需要加 A 的量会有所不同，可通过减少反应时间来调整加 A 的长度，该酶在 37°C 反应 30 分钟时可加30 个 A 碱基，1 小时可加 100 个 A 碱基。