凝血酶原时间PT试剂盒使用方法
PT测定是外源性凝血系统较理想和常用的筛选试验,也可作为外源性途径及共同途径凝血因子的定量试验,同时,也可用于口服抗凝剂治疗的监控。
PT延长:见于先天性凝血因子Ⅱ、V、Ⅶ、Ⅹ缺乏症,低(无)纤维蛋白原血症,DIC,原发性纤溶症,VitK缺乏,肝病,口服抗凝剂、肝素和FDP等。
PT缩短:见于先天性凝血因子V增多,口服避孕药,高凝状态,血栓性疾病等。
待测血浆加入过量的含钙组织凝血活酶,重新钙化的血浆在组织因子存在时激活因子X
成为Xa,后者使凝血酶原转变为凝血酶,凝血酶使纤维蛋白原转变为不溶性纤维蛋白,测定凝固所需的时间,即为待测血浆凝血酶原时间
1.PT试剂:8瓶/10瓶(含组织因子、缓冲液、0.5%BSA、防腐剂)
储存条件及有效期: 未开启试剂于+2~+8℃保存可稳定至标签所示失效日期;试剂复溶后于
+2~+8℃可保存7天。试剂保存应防止冷冻
注:产品生产日期和有效期见外包装盒
凝血仪、日立3500全自动生化分析系统(见附页)
1.静脉釆血,置于含有1/10体积0.109mol/L枸橼酸钠抗凝液(1份抗凝液+9份全血)的塑料管或硅化玻璃管中,轻轻颠倒混匀,3000rpm(或2500g)离心15分钟,收集上层液(血浆,黄色)。
2.采血必须使用一次性塑料注射器或硅化玻璃注射器,贮血必须使用塑料试管或硅化玻璃管。不宜使用普通玻璃器,避免凝血因子活化。
3.采血时止血带不可束缚过紧,而且不应超过5分钟,否则导致凝血及纤溶因子活化。
4.不宜使用EDTA·Na2、肝素、草酸盐作为抗凝剂。
5.红细胞比容超过55%或小于20%时,应调整抗凝剂用量。抗凝剂体积(ml)=0.00185×血液体积(m1)×(100—比容)。
6.样本采集避免溶血及组织液污染。
7.样本在不同条件下可保存时间如下:+2~+8℃保存,不宜超过6小时;+22~+24℃保存,不宜超过2小时测定。
1.试剂重建与保存
每瓶PT试剂加入瓶标标示体积的缓冲液,轻摇溶解。
2.半自动凝血仪、手工测定
取待测血浆0.1m,37℃孵育3分钟,加入37℃预温PT试剂0.2ml,记录凝固时间,即为PT值。
3.全自动凝血仪/全自动生化分析系综测定
4.数据处理
凝血酶原时间比值(PTR)=待测血浆PT÷平均正常凝血酶原时间
国际化比值(INR)=PTRIsI