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ELisa实验显色和比色的重要性 极威生物
点击次数：3682 发布时间：2021/6/29 19:04:42
ELisa实验显色和比色的重要性 极威生物
在Elisa实验中，显色和比色是elisa实验的后半段，但是这后半段的操作也是不可小视，必须得认真的来做，否则，一样会影响实验效果，关于显色和比色，我们来简单了解一下。
TMB 经HRP 作用后，约40 分钟显色达顶峰，随即逐渐减弱，至2 小时后即可完quan消退至无色。TMB的终止液有多种，叠氮钠和十二烷基硫酸钠（SDS）等酶抑制剂均可使反应终止。这类终止剂尚能使蓝色维持较长时间（12-24 小时）不褪，是目视判断的良好终止剂。
此外，各类酸性终止液则会使蓝色转变成黄色，此时可用特定的波长（450nm）测读吸光值。酶标比色仪简称酶标仪，通常指专用于测读ELISA 结果吸光度的光度计。酶标仪的主要性能指标有：测读速度、读数的准que性、重复性、精que度和可测范围、线性等等。
优良的酶标仪的读数一般可精que到0.001，准que性为±1%，重复性达0.5%。酶标仪不应安置在阳光或强光照射下，操作时室温宜在15~30℃，使用前先预热仪器15-30 分钟，测读结果更稳定。
测读A 值时，要选用产物的敏感吸收峰，如OPD 用492nm 波长。有的酶标仪可用双波长式测读，即每孔先后测读两次，第yi次在最适波长（W1），第二次在不敏感波长（W2），两次测定间不 移动ELISA 板的位置，最终测得的A 值为两者之差（W1-W2）。双波长式测读可减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
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