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技术文章
三碘甲腺原氨酸定量测定Elisa试剂盒说明书-价格/规格-极威生物
点击次数：3810 发布时间：2021/1/14 20:32:27
（酶联免疫法）说明书
【产品名称】
中文名称：三碘甲腺原氨酸定量测定试剂盒 （酶联免疫法）
英文名称：Quantitative Diagnostic Kit for 3,5,3’-triiodothyronine（ELISA）
【型号规格】
本试剂盒为48T/96T盒
三碘甲腺原氨酸定量测定elisa试剂盒说明书-价格/规格-GIVEI生物
【预期用途】
本试剂盒用于定量测定犬血清中三碘甲腺原氨酸含量。
甲状腺是犬主要的分泌激素腺体之，能分泌甲状腺素（T4）和三碘甲腺原氨酸（T3）。血液循环系统甲状腺激素的水平，常常反映甲状腺的功能。
本试剂盒适用于各种酶标仪。
三碘甲腺原氨酸定量测定Elisa试剂盒说明书-价格/规格-GIVEI生物
【检验原理】
试剂盒采用酶联免疫分析方法。采用生物素标记T3，纯化的抗T3抗体包被微孔板，在竟争抑制反应中，定量的固相抗体与生物素标记T3及非标记抗原（校准品或标本）进行抑制竟争反应，抗体与生物素标记的T3结合量受非标记抗原量所抑制，非标记抗原量多,抗体与生物素标记的T3结合就少，反之结合就多；反应平衡后，形成固相抗体-生物素化T3，再加入酶标记的亲和素，形成固相抗体-生物素化T3 -HRP-亲和素复合物。经加底物显色后，用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值）。随着T3浓度的升高，OD值逐渐下降呈良好的线性关系。本试剂盒具有灵敏度高、特异性强、重复性好、操作简单、快速等特点，对血清中T3的减少或升高有可靠的检出性能。
三碘甲腺原氨酸定量测定Elisa试剂盒说明书-价格/规格-GIVEI生物
【主要组成成份】
| 组份/规格 | 96T | 48T |
| 预包被板 | 12孔/条×8条 | 12孔/条×4条 |
| 生物素-T3 | 6ml/瓶×1瓶 | 3ml/瓶×1瓶 |
| 酶标亲合素 | 6ml/瓶×1瓶 | 3ml/瓶×1瓶 |
| 校准品套 | 1ml/瓶×5瓶 | 1ml/瓶×5瓶 |
| A液 | 7ml/瓶×1瓶 | 3.5ml/瓶×1瓶 |
| B液 | 7ml/瓶×1瓶 | 3.5ml/瓶×1瓶 |
| 终止液 | 7ml/瓶×1瓶 | 3.5ml/瓶×1瓶 |
| 浓缩洗涤液 | 15ml/瓶×1瓶 | 15ml/瓶×1瓶 |
| 说明书 | 1份 | 1份 |
| 粘胶板 | 2块 | 2块 |
| Log-log双对数纸 | 1份 | 1份 |
| 密封袋、干燥剂 | 套 | 套 |
T3校准品浓度；
| 单位 | S1 | S2 | S3 | S4 | S5 |
| ng/ml/ | 0.5 | 1.0 | 2.0 | 4.0 | 8.0 |
| nmol/l | 0.77 | 1.54 | 3.07 | 6.14 | 12.29 |
各组份应在使用充分摇匀。
【储存条件及有效期】试剂盒保存于2～8℃。有效期为十二月，请在试剂盒标注的“有效期至”日期内使用。
微孔板打开后应置有干燥剂的封口袋中密封防潮保存。
【适用仪器】各种型号酶标仪，必配450nm滤光片，选配600-630nm滤光片。
【样本要求】取血样后分离血清，2~8℃保存不超过48小时，长期保存可冻存于-20℃。
三碘甲腺原氨酸定量测定Elisa试剂盒说明书-价格/规格-GIVEI生物
【试验方法】
1、 将各种试剂移至室温（18~25℃）平衡半小时，取浓缩洗涤液，根据当批检测数量，用蒸馏水1：20稀释，混匀后备用。
2、 将预包被板从密封袋中取出，设个空白对照孔，不加任何液体；每个校准品设2孔；除空白孔外所有孔加入生物素化抗原50ml，混匀，贴上不干胶封片，置37℃温育60分钟。
3、 手工洗板：弃去孔内液体，洗涤液注满各孔，静置10甩干，重复3次后拍干。
洗板机洗板：选择洗涤3次程序洗板后拍干。
4、 每孔加入酶标亲和素50ml（空白对照孔除外），混匀，贴上不干胶封片，置37℃温育30分钟。
5、 手工洗板：弃去孔内液体，洗涤液注满各孔，静置10甩干，重复3次后拍干。
洗板机洗板：选择洗涤3次程序洗板后拍干。
6、 每孔加显色剂A 50ml，显色剂B 50ml，振荡混匀后，置37℃避光显色15分钟，每孔加终止液50ml。
7、 用酶标仪读数，单波长酶标仪需先用空白对照孔调零点，然后测定各孔吸光值。
【对试验结果的解释】
实验数据的处理：以各校准品的OD值为纵轴（log对数坐标）,浓度为横轴(log对数坐标),在对数坐标纸上绘制标准曲线,在标准曲线上查出待测标本的T3含量(ng/ml)。或用电脑拟合双对数直线回归方程式，根据样品的OD值，计算出样品的浓度。方程式为:log[OD]=Blog[浓度]+A
【检验方法的局限性】
样本严重溶血可能会影响检测结果。
【产品性能指标】
1、灵敏度：灵敏度：0.5 ng/ml(0.76nmol/L)
2、精密度：变异系数CV≤15%
3、剂量反应曲线线性：不低于0.980
4、交叉反应
| 反应因子 | 配制浓度 | 测量值 |
| T4 | 5000 ng/ml | ≤ 0.5ng/ml |
| rT3 | 500 ng/ml | ≤ 0.5ng/ml |
【注意事项】
1、试剂盒宜存放于2～8℃。
2、预包被板须密封防潮。
3、做实验必须将试剂盒恢复至室温（18~25℃），加试剂应先摇匀，加样中应避免交叉污染。
4、温育反应过程中必须贴粘胶板。
5、不同批号试剂不能混用。
6、试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或人体实验。
原创作者：上海极威生物科技有限公司
