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产品名称：兔抗人博莱水解酶多克隆抗体
英文名称：Rabbit anti-human bleomycin hydrolase polyclonal Antibody
克隆类型：多克隆抗体
抗体亚型：IgG
储存条件：运4°C.交付的样品和商店在20°C或80°避免反复冻。
产品提供形式：液体

免疫组化实验方法

兔抗人博莱水解酶多克隆抗体免疫组化方法的具体步骤为：
1、取材：取实验组和对照组动物组织尽可能新鲜，PBS(磷酸盐缓冲液)洗，取小于0.5cm×0.5cm×0.1cm组织块，
2、固定和包埋：用4%多聚甲醛（0.1MPBS,PH7.0～7.6,含0.1%DEPC）进行固定，经70%乙醇30分钟、80%乙醇30分钟、90%乙醇30分钟两次、95%乙醇30分钟两次、100%乙醇30分钟两次、二甲苯透明30分钟两次、55℃石蜡中30分钟两次、用铜制模具包埋组织块；
3、切片：将厚度5um的组织切片附于经多聚赖氨酸附膜的载玻片上，60℃过夜；
4、脱蜡、入水：将切片浸于二甲苯中5分钟两次、100%乙醇5分钟两次、95%乙醇5分钟两次、90%乙醇5分钟两次、85%乙醇5分钟两次、75%乙醇5分钟两次、自来水冲洗、PBS洗两次；
5、1%甲醇双氧水,室温10分钟, 蒸馏水洗1次,0.1MPBS洗3次×5分钟;
6、切片上滴加抗原修复液,室温10分钟，0.1MPBS洗3次×5分钟;
7、切片上滴加正常山羊血清封闭液，室温20分钟。甩去多余液体，不洗。
8、切片上滴加第一抗体，4℃过夜，0.1MPBS洗3次×5分钟。
9、切片上滴加生物素化第二抗体（IgG），37℃20分钟，0.1MPBS洗3次×5分钟；
10、切片上滴加辣根酶标记链霉卵白素工作液（S-A/HRP），37℃20分钟，0.1MPBS洗3次×5分钟；
11、DAB显色：使用DAB显色试剂盒1ml蒸馏水加显色剂A、B、C各一滴，混匀，加至标本上，显色6分钟，充分水洗；
12、苏木素复染细胞核1分钟，充分水洗、1%盐酸酒精分化、1%胺水反蓝、充分水洗、经70%乙醇5分钟、80%乙醇5分钟、90%乙醇5分钟两次、95%乙醇5分钟两次、100%乙醇5分钟两次脱水、二甲苯透明5分钟两次、中性树脂封片，
13、显微镜观察：选择实验组和对照组的阳性和阴性组织相、进行100×和400×的显微照相。14、图象分析：选择有意义的组织相，经登录、编号、采集、分析、读取数据、最后存盘。

兔抗人博莱水解酶多克隆抗体注意事项
1. 一抗、二抗的稀释度、作用时间和温度对不同的蛋白要经过预实验确定最佳条件。

2. 显色液必须新鲜配置使用，最后加入H2O2。

3. DAB有致癌的潜在可能，操作时要小心仔细。

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