小鼠Dickkopf相关蛋白2(DKK2) ELISA 试剂盒

检测原理

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联吸附试验（ELISA）。往预先包被相关指标的抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的相关指标呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

产品规格：96T/48T（可拆）

产品数量：咨询

产品应用：ELISA实验

产品货期：现货

有效期：6个月

保存条件：2-8℃

ELISA试剂盒如何操作

1.包被：用PH9.6的CBS包被液稀释包被抗原至5μg/ml，酶标板中每孔加入50μl，室温、4℃或37℃过夜包被。

2.洗涤：弃包被液（用力拍干，再用无尘纸吸干），用PH7.2⁻⁷.4的1×PBST洗涤液洗板3次（每孔均要加满），每次3min~5min。

3.封闭：每孔加封闭液（1%BSA）250μl，37℃封闭2h。

4.洗涤：用1×PBST洗涤液洗板3次，每次3min~5min。

5.结合一抗：用1×PBST缓冲液1∶1000稀释被检血清，每孔100μl，要设立阴性对照，37℃孵育1.5h。

6.洗涤：同上。

7.结合酶标二抗：每孔加1×PBST缓冲液1000倍稀释的酶标二抗羊抗鼠IgG-HRP（稀释倍数根据产品不同有所不同，可按说明书进行）50μl，37℃孵育1h。

8.洗涤：同上。

9.显色：每孔加底物溶液（TMB）50μl，置室温避光显色10min。

10.待显色后，每孔加入50μl终止液（2mol/L H2SO4）终止反应。使用酶标仪读取450nm的OD值，以确定血清抗体水平。

以上步骤仅供参考，具体操作请根据实际情况和产品说明书进行。

注意事项

1. 试剂盒保存于2-8℃，切勿反复冻融或长时间保存于室温。

2. 实验确保所有试剂均已恢复至室温。

3. 加样时注意避免产生气泡。

4. 洗涤时要保证充分洗涤，避免残留物影响实验结果。

5. 底物溶液应避光保存，避免长时间暴露于空气中。

6. 酶标仪应使用450nm波长进行读数，其他波长可能导致误差。

7. 本试剂盒仅用于科研实验和诊断参考，不适用于临床诊断和治疗。

ELISA测定结果如何计算

1.计算阴性对照A值的平均数(NCX )和阳性对照A值的平均数(PCX)。

2.两个平均数的差(P-N)必须大于一个特定的数值，例如0.400，试验才有效。

3.3个阴性对照A值均应≥0.5×NCX，并≤1.5×NCX，如其中之一超出此范围，则弃去，而已另两个阴性对照重新计算NCX；如有两个阴性对照A值超出以上范围，则该次实验无效。

4.阳性判定值按下式计算：阳性判定值=NCX+0.05。

5.标本A值>阳性判定值的为阳性，小于阳性判定值的为阴性。

需要注意的是，试剂盒的常数只适合于该特定条件下，而不是对各种试剂均可通用。

洗板方法

1.手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置 1min 后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板 5次。

2.自动洗板机：每孔注入洗液 350μL，浸泡 1min，洗板 5 次。

ELISA的优点

1. 特异性高：由于是抗原抗体的特异性结合，因此试验的特异性很高，能够排除其他物质的干扰。

2. 灵敏度高：由于酶的放大作用，使得试验的灵敏度大大提高，能够检测出微量的抗原或抗体。

3. 操作简便：ELISA试验操作相对简单，容易掌握，适合于大规模样本检测。

4. 适用范围广：可以用于检测各种抗原、抗体和激素等生物分子。

公司简介

上海笃玛生物科技有限公司是一家国内合资集科研和生产为一体的业化生物公司。业提供各类进口品牌，研发生产ELISA试剂盒、细胞株、抗体、耗材、培养基等产品，并提供实验外包，技术指导，操作指导，代做实验，代做课题等技术服务。公司拥有研发团队、研发平台及现代化的生产基地，生产各类科研用的产品。 我们由衷的感谢海内外科学家、感谢国内外广大科研工作者、学者予以我们鼎力的支持和理解，我们将在未来的工作中，百尺竿头，发挥优势，勇于开拓、自主创新、敢为人先、锲而不舍，在生命科学的道路上，不断进取，奋发努力，瞄准国际生命科学的沿，不断创新研发新产品。为科研工作提供更好、更人性化的服务。

（Shanghai Duoma Biotechnology Co. , Ltd is a domestic joint venture integrating scientific research ａnd production as one of the specialized biological companies. We specialize in providing various imported brands, R&D ａnd production of ELISA kits, cell strains, antibodies, consumables, culture media ａnd other products, as well as technical services such as experimental outsourcing, technical guidance, operation guidance, experimentation ａnd research. The company has a world-class R&D team, leading technology, cutting-edge R&D platform ａnd modern production base to produce various scientific research products. We are sincerely grateful to scientists at home ａnd abroad, scientific researchers ａnd scholars at home ａnd abroad for their strong support ａnd understanding. In the future work, we will give full play to our advantages, dare to pioneer, independently innovate, dare to be pioneering ａnd persevere, keep forging ahead on the road of life science, strive hard, aim at the frontier of international life science, ａnd continuously innovate ａnd develop new products. Provide better ａnd more humanized services for scientific research.）

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