鸡磷脂酰肌醇蛋白聚糖1(GPC1) ELISA 试剂盒
试剂盒性能:
1. 检测范围:1.95 nmol/L –100 nmol/L。
2. 灵敏度:检测浓度小于0.78 nmol/L。
3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性:板内变异系数小于10% ,板间变异系数小于15% 。
实验步骤
1. 准备:准备好所有试剂、材料和器具。
2. 温育:将包被有特异性抗体的酶标板放入37℃温箱中温育30分钟。
3. 加样:分别向各孔中加入标准品、待测样本,轻轻混匀。
4. 温育:将酶标板放入37℃温箱中继续温育30分钟。
5. 洗涤:清洗酶标板,除去未结合的抗原抗体。
6. 加酶标二抗:向各孔中加入酶标二抗,轻轻混匀。
7. 温育:将酶标板放入37℃温箱中继续温育30分钟。
8. 洗涤:清洗酶标板,除去未结合的酶标二抗。
9. 加底物溶液:向各孔中加入底物溶液,轻轻混匀。
10. 显色:将酶标板放入37℃温箱中继续温育15分钟。
11. 终止:向各孔中加入终止液,混匀。
12. 测量:在450nm波长下测量各孔的光密度值(OD值)。
试剂盒会出现的问题及解决办法:
1. 加入反应终止液后,没有吸光值或吸光值偏低。
a.原因:未加入酶标记物。
解决办法:请按照操作步骤进行。
b.原因:试剂盒内容物未能充分回。
解决办法:确定试剂盒内容物回温后再进行操作。
c.原因:室温太低。
解决办法:若室温太低(<19℃),请于操作步骤4,适当延长温育时间。
d.原因:未使用试剂盒的清洗液清洗。
解决办法: 请用试剂盒内所提供的清洗液清洗。
e.原因:试剂盒已过有效期限。
解决办法:请更换成仍在有效期限内的试剂盒。
2. 标准曲线线性不佳,或是平行性不好。
a.原因:温育位置避光不好或受到气流干扰。
解决办法: 请确认温育位置既不透光也不透风(如抽屉内)。
b.原因:操作时间拖太久。
解决办法:请在方法熟练后再进行操作。
c.原因:微孔间相互污染。
解决办法: 加样品时,请小心勿溅出微孔外,以免造成其它微孔的污染。
d.原因:标准品或酶标记物所加入的量不一致。
解决办法:请使用已校正过的移液枪,并确保其与吸头之间有高度密合性。
e.原因:添加样品或试剂的操作方法不正确。
解决办法:加样品或试剂时,吸头请勿接触微孔。
f.原因:洗板过程发生问题(如管路堵塞、洗完板后未立刻进行下一步骤)。
解决办法:请随时监控洗板机洗板过程,洗完后立即进行下一步骤。
注意事项
1. 实验请仔细阅读本试剂盒的使用说明,确保所有材料、器具和试剂准备齐全。
2. 为保证实验结果的准确性,请务必遵循实验步骤进行操作,并注意控制实验条件的一致性。
3. 实验过程中请勿触摸酶标板上的酶标抗体区域,以免影响实验结果。
4. 实验结束后请及时清洗并整理实验器具,避免交叉污染。
5. 本试剂盒仅供体外诊断使用,使用请仔细阅读说明书,如有疑问请及时联系厂家或业技术人员。
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免责声明
试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或生物体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担, 本公司概不负责。
严格按照说明书操作,不同批号不可交换使用,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。