兔膜联蛋白A5(ANXA5) ELISA 试剂盒

试剂盒组成

1. 酶标板：用于包被抗原和加入酶标抗体；

2. 酶标抗体：与待测血清中的、、、、结合；

3. 抗原：用于包被酶标板，与待测血清中的、、、、结合；

4. 阴性对照血清：用于设置阴性和阳性对照；

5. 阳性对照血清：用于设置阴性和阳性对照；

6. 洗涤液：用于清洗酶标板；

7. 底物：用于显色反应；

8. 终止液：用于终止显色反应。

操作步骤

1. 准备工作

（1）将试剂盒从冰箱中取出，放置至室温；

（2）准备所需的试剂和样品；

（3）将酶标板用洗涤液清洗干净。

2. 包被抗原

（1）将抗原按照说明书要求稀释后，加入酶标板孔中，每孔100μL；

（2）将酶标板轻轻摇晃，使抗原充分覆盖酶标板孔底部；

（3）将酶标板放入湿盒中，4℃孵育过夜。

3. 洗涤和干燥

（1）取出酶标板，用洗涤液清洗5次，每次清洗时间为1分钟；

（2）用吸水纸轻轻吸干酶标板表面的水分。

4. 加样和孵育

（1）在每个酶标板孔中加入100μL待测血清；

（2）将酶标板轻轻摇晃，使血清充分覆盖抗原；

（3）将酶标板放入湿盒中，37℃孵育1小时。

5. 洗涤和干燥

（1）取出酶标板，用洗涤液清洗5次，每次清洗时间为1分钟；

（2）用吸水纸轻轻吸干酶标板表面的水分。

6. 加酶标抗体

（1）在每个酶标板孔中加入100μL酶标抗体；

（2）将酶标板轻轻摇晃，使酶标抗体充分覆盖抗原；

（3）将酶标板放入湿盒中，37℃孵育1小时。

7. 洗涤和干燥

（1）取出酶标板，用洗涤液清洗5次，每次清洗时间为1分钟；

（2）用吸水纸轻轻吸干酶标板表面的水分。

8. 加底物显色

（1）在每个酶标板孔中加入100μL底物溶液；

（2）将酶标板轻轻摇晃，使底物溶液充分覆盖抗原；

（3）将酶标板放入湿盒中，37℃孵育15-30分钟。

9. 终止反应并测量吸光度值

（1）在每个酶标板孔中加入50μL终止液；

（2）立即用酶标仪测量各孔的吸光度值。

计算

以标准物的浓度为横坐标（对数坐标），OD值为纵坐标（普通坐标），在半对数坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

兔膜联蛋白A5(ANXA5) ELISA 试剂盒

实验注意事项

1. 保证试剂盒的质量：选择正规厂家生产的试剂盒，确保试剂盒的质量和稳定性。

2. 严格控制实验条件：实验过程中要严格控制温度、pH值、离子强度等条件，以保证实验结果的准确性。

3. 避免交叉污染：实验过程中要避免交叉污染，确保每个步骤使用的试剂和材料都是清洁无污染的。

4. 标准化操作：实验操作要标准化，严格按照试剂盒说明书进行操作，避免人为误差对实验结果的影响。

5. 定期校准：定期对实验仪器进行校准，确保仪器的准确性和稳定性。

6. 保存好实验数据：实验过程中要保存好实验数据，以便后续分析和处理。

试剂盒性能：

1. 检测范围：1.95 nmol/L –100 nmol/L。

2. 灵敏度：低检测浓度小于0.78 nmol/L。

3. 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

4. 重复性：板内变异系数小于10% ，板间变异系数小于15% 。

合作单位:

中国医科大学、复旦大学、北京大学、贵阳医学院、中国农业大学

天津疾控中心、江南大学、山东大学、青岛大学、香港大学

云南省产品质量监督检验研究院

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