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猪白介素21(IL-21)酶联免疫试剂盒厂家
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价格:¥电议
更新日期:2026/7/21 11:09:59
生 产 地:中国大陆
产品型号:
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钱**
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相关标签:猪白介素21试剂盒,猪IL-21试剂盒,猪ELISA试剂盒
详细内容
猪白介素21(IL-21)酶联免疫试剂盒实验原理:
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中猪白介素 21(IL-21)水平。用纯化的猪白介素21(IL-21)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入白介素 21(IL-21),再与 HRP 标记的白介素 21(IL-21)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的白介素 21(IL-21)呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中猪白介素 21(IL-21)浓度。
猪白介素21(IL-21)酶联免疫试剂盒操作步骤:
猪白介素21(IL-21)酶联免疫试剂盒操作步骤:
1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
| 480pg/ml | 5 号标准品 | 150µl 的原倍标准品加入 150µl 标准品稀释液 |
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| 240pg/ml | 4 号标准品 | 150µl 的 5 号标准品加入 150µl 标准品稀释液 |
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| 120pg/ml | 3 号标准品 | 150µl 的 4 号标准品加入 150µl 标准品稀释液 |
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| 60pg/ml | 2 号标准品 | 150µl 的 3 号标准品加入 150µl 标准品稀释液 |
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| 30pg/ml | 1 号标准品 | 150µl 的 2 号标准品加入 150µl 标准品稀释液 |
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2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50µl,待测样品孔中先加样品稀释液 40µl,然后再加待测样品 10µl(样品最终稀释度为 5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4. 配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此重复 5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂 50µl,空白孔除外。
7. 温育:操作同 3。
8. 洗涤:操作同 5。
9. 显色:每孔先加入显色剂 A50µl,再加入显色剂 B50µl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10 分钟.
10. 终止:每孔加终止液 50µl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。
操作程序总结:


猪白介素21(IL-21)酶联免疫试剂盒注意事项:
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未
用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好
控制在 5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本 OD 值大于标准品孔第一孔的 OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
保存条件及有效期
1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6 个月
猪白介素21试剂盒,猪IL-21试剂盒,猪ELISA试剂盒



