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CD40L,CD40L抗体

CD40L,CD40L抗体

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更新日期:2026/7/21 11:08:47

生 产 地:美洲

产品型号:

简单介绍:CD40L,CD40L抗体可通过胎盘及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通过胎盘进入胎儿血流中,使胎儿形成自然被动免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通过消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。

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详细内容

产品资料

产品名称 CD40L抗体

缩 写 CD40L

蛋 白 名 CD40 ligand

别 称 IGM,IMD3,TRAP,gp39,CD154,CD40L,HIGM1,T-BAM,TNFSF5,hCD40L,CD40LG

规 格 0.1ml/420元;0.2ml/760元

免 疫 原 多肽

来 源 兔

特 异 性 抗人

克隆类型 多克隆

应 用 IH(P)免疫组化(石蜡);IH(F)免疫组化(冰冻);IC细胞免疫化学;WB免疫印迹

成 分 200μg/ml亲和纯化抗体,0.01M PBS,30%甘油。

保存条件 连续使用时4°C存储,保质期六个月;长期存储时建议分装为10ul以上小包装-20°C存储,并避免反复冻融,保质期一年。

背景资料 The protein encoded by this gene is expressed on the surface of T cells. It regulates B cell function by engaging CD40 on the B cell surface. A defect in this gene results in an inability to undergo immunoglobulin class switch and is associated with hyper-IgM syndrome

操作流程
CD40L抗体免疫吸附实验检测抗体操作方法

酶联免疫吸附试验(ELISA)用来对一个特定的可溶性蛋白分子进行定性和定量分析,如血清中的特异性抗体或蛋白质的有无及浓度。此方法是利用了聚苯乙烯检测板吸附蛋白质或抗体的能力及抗体特异性结合靶抗原的能力。一般来说,此方法可通过检测实验样品在一定波长下的吸光度,再结合已知的抗原或抗体浓度标准曲线,计算出检测样品中此抗原或抗体的浓度。有常用的ELISA检测方法。

图 . 免疫印迹法。

免疫印迹法

是一种通过凝胶电泳分离蛋白质并通过电转移把蛋白质转移到吸附膜上。一经蛋白印迹后,即可通过特异性的标记抗体检测到相应蛋白质。

十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)可用以检测已被SDS化学变性的蛋白。然而,某些特定的抗体不会再一个变性的蛋白质分子上识别其抗原表位,因此需要进行不含SDS的聚丙烯酰胺凝胶电泳。

蛋白印迹可以通过湿法或半干法进行。在前者,凝胶夹在印迹膜和各种过滤装置中间,然后把整个装置埋进一个装满三甘氨酸转移缓冲的电极槽中。在后者,夹在中间的凝胶周围只有少量的缓冲,然后封闭在电极板之间。虽然半干法转膜较快,但需要很好地拟合各部分的夹层配件,而湿法转膜很少会出现问题,可以尽量保持重复实验结果的一致性。此外,如果半干法转膜时间过长,较小分子量的蛋白质可能会从膜上转过。

转膜后,需对膜进行封闭,以减少非特异性蛋白结合,然后进行用一抗孵育膜,以研究感兴趣的目标蛋白。单克隆抗体通常具有更高的特异性;然而许多单克隆抗体产生于某个特定肽段而不是一个天然蛋白质,因此可能无法检测到PAGE所分离的天然蛋白。也可使用多克隆抗体,但易形成较高的背景值。因一抗通常无标记,所以需要一个可以结合在一抗Fc段的标记的二抗,以用于最后的检测。通常会用酶来标记二抗。酶标记后的印迹可通过化学发光酶底物及放射自显影技术成像。被抗体检测和标记到的蛋白质会出现在图像的暗区。

斑点印迹法

类似于免疫印迹法,在膜上检测目标蛋白;但是斑点印迹法中检测的蛋白质不用电泳进行分离。取而代之的是,含有目标蛋白的样品被直接“点”到膜上。这不是一种定量的方法,但它可以直接检测某种特定蛋白的有无; 例如,斑点印迹法可用于检测蔗糖梯度分离的细胞裂解产物中的某些蛋白质定位。
常见问题

CD40L抗体如何选择阳性对照?

如果您需要合适的阳性对照,请核查数据,上面通常会有建议的阳性对照。应始终确保所用组织或细胞系来自于测试过的物种。不是所有的数据表都有建议的合适对照,在这些情况下我们推荐以下步骤:

检查是否有关于这种抗体的任何 Abreviews。已由这些客户顺利采用的任何组织、细胞或溶菌产物都可以考虑用作合适的阳性对照。

尝试查看数据表上的 Swiss-Prot 或 Omnigene 数据库链接。这些数据库通常提供存在此种蛋白质表达的组织列表。这些组织也可考虑用作合适的阳性对照。

在 GeneCards 条目里查找这种蛋白质。通常您可在此处获得蛋白质在不同组织中的相对表达水平。

如果您仍然很难找到合适的对照,我们建议您来电咨询。

工作原理

抗体原理

(1)特异性结合抗原:抗体本身不能直接溶解或杀伤带有特异抗原的靶细胞,通常需要补体或吞噬细胞等共同发挥效应以清除病原微生物或导致病理损伤。然而,抗体可通过与病毒或毒素的特异性结合,直接发挥中和病毒的作用。

(2)激活补体:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通过经典途径激活补体,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通过替代途径激活补体。

(3)结合细胞:不同类别的免疫球蛋白,可结合不同种的细胞,参与免疫应答。

(4)可通过胎盘及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通过胎盘进入胎儿血流中,使胎儿形成自然被动免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通过消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。

(5)具有抗原性:抗体分子是一种蛋白质,也具有刺激机体产生免疫应答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。

(6)抗体对理化因子的抵抗力与一般球蛋白相同:不耐热,60~70℃即被破坏。各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质,均能破坏抗体的作用。抗体可被中性盐类沉淀。在生产上常可用硫酸铵或硫酸钠从免疫血清中沉淀出含有抗体的球蛋白,再经透析法将其纯化。

(7)通过与细胞Fc受体结合发挥多种生物效应

①调理作用

IgG、IgM的Fc段与吞噬细胞表面的FcγR、FcμR结合,增强其吞噬能力,通常将抗体促进吞噬细胞吞噬功能的作用称为抗体的调理作用 (opsonization)。

②发挥抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用。

常用型号

典型的F(ab’)2片段的二抗

下面总结了几种具有不同特异性的二抗:针对整个抗体分子(H+L)具有特异性:如抗IgG(H+L),此类抗体既可以与抗体的重链结合也可以与轻链结合,即与抗体分子的Fc,F(ab’)2/Fab部分(见图5)均可反应,抗IgG(H+L)也可以与其他免疫球蛋白家族反应(如IgM和IgA),因为所有的免疫球蛋白都具有相同的轻链(kappa链或lambda链)。

针对Fab片段具有特异性:这类抗体与重链轻链均可以结合,由于它们可以与轻链反应,它们同时也已和具有相同轻链的其他种类的免疫球蛋白反应。

这对Fc片段或重链具有特异性:这类抗体和重链的Fc部分反应,一次它们是类别特异性的(即gamma链特异性抗体只与IgG反应,mu链特异性抗体只识别IgM,依此类推)。

轻链(kappa,labmda)特异性:与所有类别的抗体反应,因为所有类别的抗体均具有相同的lambda链或kappa链。

经过吸附处理的二抗:不同来源的免疫球蛋白含有相似的结构,抗一个物种的抗体可能与其他物种发生交叉反应,一次有些二抗经过了动物或人类IgG吸附处理,以减少非特异性背景。例如,如果是小鼠的组织或细胞,那么选择经小鼠血清或IgG吸附处理过的二抗可以减少非特异性结合。但是此种抗体识别表位的数量被大大减少。

选择哪种形式的二抗,是整个IgG分子,F(ab’)2片段,还是Fab片段?

整个IgG分子:此种抗体适用于多数情况。

F(ab’)2片段:该种抗体是由两个靠二硫键连接的用于结合抗原的Fab片段组成,这些抗体用在特定的情况中,如需要避免抗体与具有Fc受体的细胞结合的情况。

Fab片段:它们只有一个结合位点,一般用来封闭内源性免疫球蛋白。

选用耦联有哪种探针的二抗?

一般来讲,耦联到二抗上的探针主要有酶(辣根过氧化酶HRP和碱性磷酸酶AP或其衍生物APAAP,PAP),荧光基团(FITC, RRX, TR, PE)和生物素。选用哪种探针的二抗主要取决于具体的实验。对于western blot和ELISA,最常用的二抗是酶标二抗,而细胞或组织标记实验(细胞免疫化学,组织免疫化学,流式细胞术)中通常使用荧光基团标记的二抗,免疫组化中也可以使用辣根过氧化酶或碱性磷酸酶标记的二抗。如果想要更大程度的放大检测信号,可以使用biotin/avidin检测系统。

CD40L,CD40L抗体

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