竞争ELISA的包被温度一般是多少？

竞争ELISA的包被温度一般是多少？

竞争 ELISA，尤其是表位肽体系，是 4 ℃，过夜包被，这也是最通用、重复性的条件。低温下肽或者蛋白在聚苯乙烯表面吸附更加平缓，不容易出现局部聚集，对于吸附能力偏弱的短肽，更容易获得稳定固相，后续竞争窗口也更可控。

如果赶实验进度，可以备选三十七摄氏度，一般孵育两到三小时。这个速度更快，但波动会更大，亲水短肽很容易挂板不足，疏水肽则更容易因为局部富集造成背景升高，最大抑制率有时会不如四度过夜。室温包被不推荐作为正式条件，室温本身浮动大，板与板之间差异很难控制，只适合粗略预筛。

一旦选定温度，就要配套固定时长，不要随意混搭。如果换成链霉亲和素板结合生物素肽，吸附机制不再依靠疏水被动吸附，通常选用室温或者三十七摄氏度孵育，不需要长时间低温过夜。另外无论哪种温度，包被的时候都要封膜，避免蒸发带来信号异常。

来源：上海笃玛生物科技有限公司