ELISA实验检测类型

直接 ELISA 是把抗原包在板上，然后加入已经标记酶的一抗，底物显色就能读数，步骤简单，没有二抗带来的交叉反应，但缺少信号放大，灵敏度偏低，而且每一种一抗都需要单独标记，成本偏高，一般用来检测高丰度抗原，很少用来做定量。

间接 ELISA 同样先包被抗原，常用在表位肽体系里，先加没有标记的一抗，洗涤之后再加入酶标记的二抗，依靠二抗实现信号放大，灵敏度更好，二抗还可以通用。缺点是更容易出现非特异吸附，封闭以及种属匹配需要仔细把控，它适合检测样本里的抗体，用来做表位识别筛选和抗体效价测定，信号强弱和目标抗体含量呈正向变化。

双抗体夹心 ELISA 需要一对可以识别不同表位的抗体，捕获抗体包板，抓取样本里的抗原，再用酶标检测抗体结合抗原的另外一个表位，信号和抗原浓度正向相关。这种模式特异性和灵敏度都很好，但是要求抗原拥有至少两个独立表位，所以短肽和单表位小分子无法使用，还会存在钩状效应，多用于大分子蛋白检测。

竞争 ELISA 是适合游离短肽定量的主流类型，信号变化和待测物浓度相反。最常用的是固相包抗原的间接竞争，板上固定表位肽，游离的待测肽和固相肽竞争有限的抗体，游离肽越多，最终留在板上的抗体越少，显色也就越弱。也可以选择包被抗体，让样本抗原和酶标抗原竞争结合。它专门适配只有单个表位的小分子或者半抗原，但反应窗口比较窄，很容易出现曲线拉平，对包被条件、预孵育以及抗体亲和力都很敏感。

捕获法主要针对 IgM 检测，板上包被抗 IgM 抗体，先捕获样本中的 IgM，再去检测能够结合的抗原，多用于急性感染相关的 IgM 筛查。生物素链霉亲和素体系不属于独立的 ELISA 类型，只是一种增强或者固定的手段，可以叠加在间接、竞争或者夹心上面，在短肽固定时经常使用。细胞 ELISA 和斑点 ELISA 只是更换了固相载体，分别以细胞或者硝酸纤维素膜作为结合载体，多用于初步筛选。

来源：上海笃玛生物科技有限公司