Sulfo-CY5.5-DBCO / DBCO-sulfo-Cy5.5 / 磺化 Cy5.5 - 二苯基环辛炔 / 水溶性近红外无铜点击荧光染料

Sulfo-CY5.5-DBCO 属于磺化修饰的花青素近红外荧光探针，外观多为深色粉末，水溶性优，在纯水、常规 PBS 缓冲液中可直接溶解，不需要高比例有机溶剂助溶，对蛋白、活细胞这类对有机溶剂敏感的生物样本友好，是无铜点击标记体系里常用的长波长荧光标记试剂。

一、分子结构

分子分为两大功能模块：

·Sulfo-CY5.5荧光母核：带有磺酸盐基团的花菁结构，磺化基团赋予强水溶性；荧光发射落在近红外窗口，组织自发荧光干扰偏低，穿透深度优于短波长染料；

·DBCO（二苯基环辛炔）基团：环炔结构，是SPAAC无铜点击反应的活性位点，不需要铜离子催化，即可和叠氮（Azide）基团发生环加成反应，生成稳定的三唑环。

两个模块通过短连接臂相连，染料本身荧光性质稳定，pH 在 4–10 区间内荧光信号波动很小，适配多数生理缓冲体系。

二、作用原理

它依托无铜点击化学（SPAAC，应变促进叠氮 - 炔环加成）实现标记。传统铜催化点击反应会引入铜离子，铜离子容易造成蛋白变性、细胞毒性，限制活细胞与活体样本使用。 DBCO 自带环张力，不需要催化剂，就能和叠氮修饰的靶标自发反应，反应条件温和，常温、中性缓冲液中即可进行。标记完成后，Sulfo-CY5.5 的近红外荧光信号可以被活体成像仪、共聚焦显微镜、流式设备捕获，用来追踪靶标分子的分布、定位与富集情况。 磺化结构还可以降低染料分子的疏水聚集，标记后不容易出现荧光淬灭，标记产物分散性更好。

三、应用场景

·叠氮修饰生物分子荧光标记：标记叠氮化蛋白、多肽、多糖、核酸、抗体，用于分子互作、示踪实验；

·活细胞与活体小动物成像：利用近红外波长优势，开展皮下、深部组织的荧光成像，追踪纳米载体、细胞在体内的分布；

·多色成像组合实验：CY5.5波长较长，和CY3、FITC等染料光谱重叠少，适合多通道荧光共标方案；

·生物芯片、荧光传感、凝胶成像检测：用于构建叠氮介导的荧光捕获体系，实现定量检测。

四、选型参考

对比普通Cy5.5-DBCO（非磺化），非磺化版本水溶性弱，需要 DMSO、DMF 助溶，容易造成蛋白沉淀、细胞损伤；sulfo-CY5.5-DBCO 水相兼容性更强，优先用于蛋白、活细胞标记。

对比Sulfo-CY5-DBCO，CY5.5 波长更长，背景荧光更低，适合活体深部成像；CY5 亮度更高，更适合体外高灵敏度的显微观测。

对比BCN 类点击染料，DBCO 反应速率更快，对低丰度叠氮靶标标记效率更有优势；BCN 稳定性更好，适合长时间孵育体系。

【申明】本文仅作科学研究科普，任何情况下均不得用于人体实验、临床诊断、临床治疗及其他非科研活动。

来源：广州为华生物科技有限责任公司