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一文读懂NGS文库构建核心酶!

提供者:广东国盛医学科技有限公司   发布时间:2023/12/8 15:02:54  阅读次数:12次   进入该公司店铺

 高通量测序又称下一代测序技术(Next-generation Sequencing, NGS),相对于DNA测序技术(Sanger法),它可以同时对几十万乃至数百万条核酸分子序列进行测定,具有通量高、成本低、规模大等显著优势,应用范围非常广泛,目已经成为全球主流测序技术。

 

Illumina测序平台为例,常见的NGS检测流程包括文库构建、簇生成、边合成边测序,以及数据分析四部分(图1)。尽管目高通量测序正朝着自动化及简单化的方向发展,但测序的文库构建依旧是一个繁琐却关键的步骤。

        1.Illumina测序流程

DNA文库制备流程

文库构建的本质是将片段化后的基因组DNA两端加上通用接头序列,通过PCR扩增获取足够够上机测序的文库核酸分子。根据样本类型,又分为DNA建库和RNA建库。在DNA文库构建过程中,TA克隆连接接头建库是目商业技术中常用的技术手段,主要建库流程如下:

a)DNA片段化

b)末端修复,3‘端加A

c)接头连接

d)文库扩增

2.文库构建流程

在文库构建过程中,工作酶种类繁多,起着至关重要的作用,为得到好的连接效率,文库制备质量,反应过程一般需要五种酶的参与,分别是DNA聚合酶、Taq DNA聚合酶、T4多聚核苷酸激酶、DNA连接酶,以及高保真DNA聚合酶

NGS建库核心酶

国盛医学拥有一整套高纯度的NGS建库核心酶,并组装了自研的测序通用文库制备试剂盒,获得的建库质量、测序性能好。制备的文库可用于Ion TorrentIllumina测序平台。

产品优势

数据均一性高:均一性>95%

高保真扩增:减少假阳性测序结果

复杂区域建库质量好:高GC、高突变、高重复等复杂区域的建库质量好

模板起始量低:起始模板可低至1ng

宽范围扩增富集酶:引物对数十对至一万对之间均可扩增建库

作为蛋白酶原料供应商,我司可提供多种的NGS建库核心酶,助您组装自己的NGS文库制备试剂盒,同时也可提供各种定制服务来满足您对产品的个性化需求,为您提供检测方案。欢迎您的试用:

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