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技术文章
【细胞融合技术】以人鼠细胞杂交为例说明
点击次数：2487 发布时间：2025/3/21 10:25:12
人、鼠细胞融合实验分三步进行∶
先用荧光染料标记抗体∶
将小鼠的抗体与发绿色荧光的荧光素（fluorescin）结合，人的抗体与发红色荧光的罗丹明（rhodamine）结合；
第二步是将小鼠细胞和人细胞在灭活的仙台病毒的诱导下进行融合；
后一步将标记的抗体加入到融合的人、鼠细胞中，让这些标记抗体同融合细胞膜上相应的抗原结合。
开始，融合的细胞一半是红色，一半是绿色。在37℃下40分钟后，两种颜色的荧光在融合的杂种细胞表面呈均匀分布，这说明抗原蛋白在膜平面内经扩散运动而重新分布。这种过程不需要ATP。如果将对照实验的融合细胞置于低温（1℃）下培育，则抗原蛋白基本停止运动。这一实验结果令人信服地证明了膜整合蛋白的侧向扩散运动。
细胞融合关键
1．技术上的误差常常导致融合的失败。例如，供者淋巴细胞没有查到免疫应答。这必然要失败的。
2．融合试验大的失败原因是污染，融合成功的关键是提供一个无毒无菌的操作环境。
人、鼠细胞融合实验分三步进行∶
先用荧光染料标记抗体∶
将小鼠的抗体与发绿色荧光的荧光素（fluorescin）结合，人的抗体与发红色荧光的罗丹明（rhodamine）结合；
第二步是将小鼠细胞和人细胞在灭活的仙台病毒的诱导下进行融合；
后一步将标记的抗体加入到融合的人、鼠细胞中，让这些标记抗体同融合细胞膜上相应的抗原结合。
开始，融合的细胞一半是红色，一半是绿色。在37℃下40分钟后，两种颜色的荧光在融合的杂种细胞表面呈均匀分布，这说明抗原蛋白在膜平面内经扩散运动而重新分布。这种过程不需要ATP。如果将对照实验的融合细胞置于低温（1℃）下培育，则抗原蛋白基本停止运动。这一实验结果令人信服地证明了膜整合蛋白的侧向扩散运动。
细胞融合关键
1．技术上的误差常常导致融合的失败。例如，供者淋巴细胞没有查到免疫应答。这必然要失败的。
2．融合试验大的失败原因是污染，融合成功的关键是提供一个无毒无菌的操作环境。
原创作者：上海远慕生物科技有限公司
