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技术文章

PCR污染被揭露,为XMRV的争论火上浇油

点击次数:3238 发布时间:2019/10/30 10:32:28

异养性小鼠白血病相关病毒 (XMRV) 与慢性疲劳综合征 (CFS)、一种病因不明的衰弱状态以及前列腺癌有关。这些关联引发了激烈的争论,随后的研究要么支持要么质疑这种关联。

然而,大多数研究,无论是支持还是否定 XMRV 与这两种疾病之间的联xi,都严重依赖PCR检测提供的证据。因此,当逆转录病毒学在 2010 年 12 月发表了四篇研究文章,揭示了与 XMRV PCR 分析相关的潜在污染问题时,极大地影响了先前研究的有效性。所有四项研究都表明,老鼠的遗传物质会污染实验,导致假阳性结果。

Robinson 等通过对 437 份人体组织样本的 PCR 检测表明,虽然在前列腺癌患者中检测到了 XMRV 基因序列,但也检测到了其他小鼠基因序列。奥克斯和他的同事证实,来自 CFS 患者的 XMRV 阳性血液样本对小鼠线粒体 DNA 检测呈阳性。此外,两项研究都表明,健康患者的样本对 XMRV 和小鼠线粒体 DNA 均呈阳性。据认为,这些研究中使用的血液和组织样本在 PCR 分析之前已被小鼠 DNA 污染。



正如 Sato 等人报告的,在 PCR 过程中也可能发生污染,他们在实际的 PCR 试剂中,即从 Invitrogen 公司提供的 RT-PCR 试剂盒中检测到 MLV-编码核酸。这种污染会导致对 XMRV 的错误检测。因此,在他们的结论中,作者敦促在研究中使用 PCR 试剂盒之前谨慎评估,以消除假阳性结果的风险。

XMRV 的 PCR 检测目标是 24 -nt gag-leader 的缺失,但是 Hue 等人在他们的研究文章中指出,这种缺失并不是 XMRV 独有的,针对这种缺失的引物扩增了在实验室中使用的 12 种不同鼠株和 5 种肿瘤细胞系中发现的 MLV 序列。顺化等人从包括系统发育分析在内的多管齐下的调查中得出结论,XMRV 不是一种真正的人类病原体。

这些最近发表的文章对以前的研究结果提出了严重的质疑,这些研究结果声称证明了 XMRV 和 CFS 或前列腺癌之间存在联系,并规定在未来的调查中要考虑和考虑这些污染源,以使新发现可信。

原创作者:上海远慕生物科技有限公司

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