企业档案
会员类型：旗舰版
已获得阿仪网信誉 等级评定
(0 -40)基础信誉积累，可浏览访问
(41-90)良好信誉积累，可接洽商谈
(91+ )优质信誉积累，可持续信赖
阿仪网旗舰版会员：14年
工商认证 【已认证】
最后认证时间：
注册号：**** 【已认证】
法人代表： 【已认证】
参观次数：7028098
手机网站：http://wap.app17.com/c85413/
旗舰版网址：http://www.shxfbio.com
技术文章
超好用的Tn5 转座酶，欢迎咨询
点击次数：4090 发布时间：2019/12/3 10:06:33
超好用的Tn5 转座酶，欢迎咨询
上海信帆生物供应Robust Tn5 转座酶，产品供应，家有需要可以随时咨询！
Robust Tn5 转座酶
Robustnique
体外转基因操作:
Robust Tn5转座酶可以将含有成对识别序列的双链DNA段（如下图所示）随机整合到宿主细胞的基因组中。整合的过程分为两步：
首先，Robust Tn5转座酶同含有选择标记和识别序列的目标基因片段结合，形成转座体（Transposome）；之后，通过转化的方式将
转座体导入宿主细胞，利用选择标记筛选成功整合目标基因的宿主细胞。
核酸外切酶活性：50 μl反应体系中，20 U本酶与1 μg的pUC19质粒于37°C下温育4小时，DNA的电泳条带无明显变化。
RNase活性：50 μl反应体系中，100 U本酶与250 ng肠杆菌rRNA于37°C温育2小时，经琼脂糖电泳检测，被降解的rRNA小于1%。
1. Zhou, M., Bhasin, A., ａnd Reznikoff, W. S. (1998) J. Mol. Biol. 276, 913-925.
2. Ason, B., Reznikoff, W. S. (2004) J. Mol. Biol. 335, 1213-1225.
质量控制检测:
参考:
应用:
概述：Robust Tn5转座酶是野生型Tn5转座酶的高活性突变体，可以高效的将Tn5转座子插入到目标序列。Robust Tn5转座酶识别Tn5
转座子酶序列的内端（inside end，IE）、外端（outside end，OE）和嵌合端（mosaic end，ME）序列，含有ME序列片段的体外转
座效率高(1)。Robust Tn5转座酶的插入位点具有很高的随机性(2) ，因此被广泛的用于体外转基因（外源基因整合到宿主细胞）和二代
测序建库等领域。
来源：含有Robust Tn5转座酶序列的肠杆菌菌株。
应用：体外转基因（外源基因整合到宿主细胞），二代测序建库。
贮存溶液：50 mM Tris-HCl (pH 8.0 @ 25 °C)，100 mM NaCl，0.1 mM EDTA，0.1% Triton X-100和50%甘油(V/V)。
反应缓冲液：（随酶提供）10x转座反应缓冲液。
单位定义：1单位Robust Tn5转座酶指37°C条件下反应1小时，完全切割1 μg含有识别序列的DNA段所需要的酶量。
重组酶
包装:
浓度:
存储:
25 U
1,000 U/ml
-20°C
该反应体系可根据需要进行放。
1.2 充分混匀，室温（25 °C ）放置30分钟。
1.3 取1-4 μl反应产物进行后续的转化实验，反应产物也可放置于-20°C备用。
2 转化
可以使用的转化方法有电转化，化学转化等。转化后利用选择性标记筛选成功整合目标基因的宿主细胞。
1 转座体（Transposome）的构建*
1.1 准备如下反应体系：
成分
目标基因片段(含选择标记和成对识别序列,100 μg/ml)
Robust Tn5转座酶
100%甘油
体积
2 μl
4 μl
2 μl
Robust Tn5 转座酶供应，欢迎抢购
超好用的Tn5 转座酶，欢迎咨询
原创作者：上海信帆生物科技有限公司
