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技术文章
上海信帆生物：蛋白质盐析分离法
点击次数：3995 发布时间：2015/10/23 23:28:14
一、蛋白质盐析分离的原理：
蛋白质在稀盐溶液中溶解度会随着盐浓度的增而上升(盐溶)，当盐浓度增到一定数值时，其溶解度又逐渐下降直至蛋白质析出。盐析的发生是由于盐浓度增到一定数值时使水活性降低，导致蛋白质分子表面电荷逐渐被中和，水化膜逐渐被破坏，引起蛋白质分子之间相互聚集并从溶液中析出，后经离心机分离后获得沉淀物和上清液。
二、影响蛋白质盐析分离的因素：
1、蛋白质浓度：
蛋白质浓度过，盐析时发生共沉现象，分离效果不好。蛋白质浓度太稀，耗盐量过，蛋白质回收率低。一般蛋白质浓度在2.5%～3.0%较适中。
2、离子强度：
离子强度越，蛋白质的溶解度越低，越容易产生盐析现象。
3、离子类型：
离子半径小而价数高的离子，对盐析影响较强。离子半径而价数低的离子，对盐析影响较弱。
4、PH值：
蛋白质所带净电荷越多，溶解度越。净电荷为零时，溶解度低。一般将PH值调到蛋白质等电点附近，这样有利于盐析。
5、温度：
低离子强度或水中，在一定范围内蛋白质的溶解度随着温度的升高而增。高盐溶液中，蛋白质的溶解度随着温度的升高有时反而下降。一般情况下在0～4℃操作。
原创作者：上海信帆生物科技有限公司
