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当前位置:阿仪网>上海恒远生物科技有限公司>技术文章>ELISA试剂盒实验洗涤步骤不得马虎

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ELISA试剂盒实验洗涤步骤不得马虎

点击次数:5158 发布时间:2018/1/3 11:34:31

我公司工作人员在处理售后的过程中,有不少的客户反应,看似简单的elisa实验在操作过程中稍有不合理的地方,都会造成很多问题,从而导致实验结果的不理想。因此要求我公司技术人员在实验过程多做总结,逐步完善,筛选elisa实验各项步骤中的重点之重。那么,今天的内容我们就来讲讲elisa试剂盒的洗涤步骤。



洗涤在ELISA过程中虽不是一个反应步骤,但却也决定着实验的成败。ELISA靠洗涤来达到分离游离的和结合的酶标记物的目的,可以见得洗涤步骤的重要性。

第一、ELISA洗涤方式
[浸泡式]
1.吸干或甩干孔内反应液;
2.用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去);
3.浸泡,即将洗涤液注满板孔,放置1-2分钟,间歇摇动,浸泡时间不可随意缩短;
4.吸干孔内液体。吸干应彻底,可用水泵或真空泵抽吸,也可甩去液体后在清洁毛巾或吸水纸上拍干;
5.重复操作c和d,洗涤3-4次(或按说明规定)。在间接法中如本底较高,可增加洗涤次数或延长浸泡时间。

[流水冲洗式]
最初用于小珠载体的洗涤,洗涤液仅为蒸馏水甚至可用自来水。洗涤时附接一特殊装置,使小珠在流水冲击下不断地滚动淋洗,持续冲洗2分钟后,吸干液体,再用蒸馏水浸泡2分钟,吸干即可。浸泡式犹如盆浴,流水冲洗式则好比淋浴,其洗涤效果更为彻底,且也简便、快速。已有实验表明,流水冲洗式同样也适用于微量滴定板的洗涤。洗涤时设法加大水流量或加大水压,让水流冲击板孔表面,洗涤效果更佳。

第二、ELISA洗涤液的使用原则
1.某一项目的洗液建议使用该试剂盒内的洗液;
2.同一elisa试剂盒洗液用完了,建议采用同一批号的洗液;
3.同一批号的洗液也用完了,建议采用同一项目的试剂洗液;
4.同一项目的洗液用完了,建议使用该项目其他厂家的洗液;
5.同一项目所有厂家都用完了,建议采用同一系列项目的洗液;
6.不建议国产洗液与进口洗液混用,也更不建议不同系列项目的洗液混用,这两点都是因为洗液的配置成分不同,特别是不同项目的洗液,主要组分都不太一样。
虽然对强阳性标本影响不是很大,但对于临界阳性阴性(灰区)标本影响较大,所以不提倡不同系列项目洗液混用。


在ELISA操作中,洗涤是最主要的关键技术,应引起操作者的高度重视,操作者应严格按要求洗涤,不得马虎,各位亲们要注意哦!上海恒远生物提供全程技术指导服务及免费代检测服务。欢迎您的来电咨询与订购!

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