企业档案
会员类型：旗舰版
已获得阿仪网信誉 等级评定
(0 -40)基础信誉积累，可浏览访问
(41-90)良好信誉积累，可接洽商谈
(91+ )优质信誉积累，可持续信赖
阿仪网旗舰版会员：2年
工商认证 【已认证】
最后认证时间：
注册号： 【已认证】
法人代表： 【已认证】
参观次数：450168
科研Elisa
生化试剂盒
- 氧化磷酸化系列
- 乙醛酸循环系列
- 花青素合成系列
- 辅酶Ⅰ系列
- 光合作用系列
- 维生素系列
- 糖原系列
- 糖异生系列
- 蛋白含量测定系列
- 其它系列
- 信号系列
- 土壤系列
- 离子系列
- 糖代谢系列
- 蔗糖系列
- 淀粉系列
- 脂肪酸代谢系列
- 蛋白酶系列
- 糖酵解系列
- 三羧酸循环系列
- 酯酶系列
- 氨基酸代谢系列
- 氮代谢系列
- 维生素C代谢系列
- 谷胱甘肽系列
- 辅酶Ⅱ系列
- 果胶系列
- 氧化与抗氧化系列
- 植物激素系列
农残及其他检测
- 食品加工危害物
- 材料助剂
- 环境污染物
- 水产杀菌剂
- 保化添加物
- 抗病毒Antivirus drug
- 防霉剂Mold inhibitor
- 过敏原/营养抑制因子
- 其他食品检测试剂盒
- 重金属Heavy-Metal
- 性激素Hormone
- 抗生素Antibiotic
- 农药Pesticide
- 科研项目
- 色素Pigment
- 生理活性物
- 食品添加剂
- 动物保健
- 致病菌
- 毒素Toxin
- 金标试剂盒
- 动物金标试剂盒
其他试剂盒
技术文章
ELISA试剂盒技术原理及方法对比
点击次数：184 发布时间：2025/4/17 9:54:37
ELISA试剂盒技术原理及方法对比
1971年瑞典学者Engvail和Perlmann，荷兰学者Van Weerman和Schuurs分别报道将免疫技术发展为检测体液中微量物质的固相免疫测定方法，即熹纭免疫吸附测定法 (ELISA) 。
1. ELISA技术原理
ELISA 是将抗原抗体的特异性免疫反应与酶的催化反应相结合的免疫检测技术，利用酶标技术标记抗原或抗体，通过显色反应，用以检测相应的抗体或抗原，对其进行定性或定量分析。
① 将已知的抗原或抗体通过物理吸附于固相载体表面，并保持其免疫学活性；
② 利用酶标技术使抗原或抗体与酶形成酶结合物，并保持酶标抗原或抗体的免疫活性及酶的活性；
③ 酶结合物与相应的抗原或抗体结合后，加入底物，底物被酶催化显色，依据底物颜色反应及深浅判断待测物中相应抗体或抗原的量。
2. 三种必要的试剂
在这种测定方法中有3种必要的试剂：
① 固相的抗原或抗体（免疫吸附剂）
② 酶标记的抗原或抗体（标记物）
③ 酶作用的底物（显色剂）
3. ELISA四种常用的方法
ELISA可用于测定抗体,也可用于检测抗原。根据检测目的和操作步骤不同,有四种类型的常用方法：间接法、双抗体夹心法、双抗原夹心法、竞争法。
3.1 间接法（此法是测定抗体常用的方法）
将已知抗原吸附于固相载体,加入待检标本(含相应抗体)与之结合。洗涤后,加入酶标抗球蛋白抗体(酶标抗抗体)和底物进行测定。
3.2 双抗体夹心法（此法常用于测定抗原）
将已知抗体吸附于固相载体、加入待检标本(含相应抗原)与之结合。温育后洗涤,加入酶标抗体和底物进行测定。
3.3 双抗原夹心法（此法多用于乙肝抗体检测）
将已知抗原吸附于固相载体、加入待检标本(含相应抗体)与之结合。温育后洗涤,加入酶标抗原和底物进行测定。
3.4 竞争法（此法可用于抗原和半抗原的定量测定，也可用于测定抗体）
以测定抗原为例，将持异性抗体吸附于固相载体;加入待测抗原和一定量的酶标已知抗原,使二者竞争与固相抗体结合;经过洗涤分离,后结合于固相的酶标抗原与待测抗原含量呈负相关。
4. ELISA四种方法的比较
| 方法 | 注意点 | 优势 | 缺点 |
|---|---|---|---|
| 间接法 Indirect ELISA | 关键是抗原的纯度。也要注意正常血清中所含的高浓度的非特异性抗体这一干扰因素。 | 二抗可以加强信号，而且有多种选择能做不同的测定分析。不加酶标记的一级抗体则能保留它多的免疫反应性。 | 交互反应发生的机率较高。 |
| 双抗体夹心法Sandwich ELISA | 两种抗体必须小心选取，才可避免交互反应或竞争相同的抗原结合部位。 | 高灵敏、高专一性，抗原无须事先纯化。 | 抗原一定得拥有两个以上的抗体结合部位。 |
| 双抗原夹心法Sandwich ELISA | 关键在于酶标抗原的制备。根据抗原结构的不同，寻找合适的标记方法。 | 受检标本不需稀释，可直接用于测定，因此其敏感度相对高于间接法。 | 只适用于某些项目，受抗原大小等很多因素影响。 |
| 竞争法 Competitive ELISA | 这两种抗体必须小心选取，才可避免交互反应或竞争相同的抗原结合部位。 | 可适用比较不纯的样本，而且数据再现性很高。 | 整体的敏感性和专一性都较差。 |
原创作者：上海熹纭生物科技有限公司
