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技术文章
AF 568 ECL,AF568标记刺桐凝集素,可用于多色免疫荧光共定位实验
点击次数:8 发布时间:2026/11/12 9:31:17
产品介绍
AF568 ECL是将从刺桐(Erythrina Cristagalli)种子中天然提取纯化的刺桐凝集素,与Alexa Fluor 568荧光染料通过成熟的NHS酯共价偶联工艺制备而成的糖链特异性橙红通道标记科研试剂。它完整保留了刺桐凝集素对半乳糖末端糖链、尤其是β-D-半乳糖-(1→4)-N-乙酰葡糖胺结构的高亲和力识别特性,依托Alexa Fluor 568罗丹明类衍生物的高摩尔吸光系数与光稳定性,全程严格控制染料与蛋白的投料摩尔比,通过多步凝胶过滤层析去除未反应的游离染料,解决了传统同波段凝集素水相溶解度低、长时间成像光漂白严重的痛点。试剂为橙红色至深红色冻干粉,在中性生理缓冲液中溶解分散性良好,是橙红通道开展半乳糖末端糖链靶向研究的标杆级高稳定工具。
基础参数
中文名称:AF568标记刺桐凝集素,AF568-刺桐凝集素
英文名称:AF 568 ECL,Alexa Fluor568-ECL,AF568-Erythrina Cristagalli Lectin
外观状态:橙红色至红色冻干粉
荧光光谱参数:最大激发波长约578 nm,最大发射波长约603 nm,与Cy3通道完全兼容,适配常规荧光显微镜、共聚焦成像及荧光扫描仪
储存条件:-20℃避光密封干燥长期保存,避免反复冻融,复溶后建议分装为单次使用量,4℃避光短期可稳定存放,操作全程避免长时间强光直射,防止荧光基团发生不可逆猝灭
用途:细胞表面糖缀合物直接荧光标记,糖蛋白印迹荧光显色,凝集素芯片信号读出,糖链探针构建
作用机理
AF568 ECL中的刺桐凝集素本身是天然二聚体糖蛋白,每个亚基都带有独立的糖结合位点,通过特异性的氨基酸残基配位作用,识别并结合样本中半乳糖末端的特征糖链结构,对β-D-半乳糖-(1→4)-N-乙酰葡糖胺结构具有明确的识别偏好。AF568荧光基团通过琥珀酰亚胺酯与凝集素表面赖氨酸残基形成稳定的酰胺键,偶联位点集中在蛋白表面远离糖结合口袋的可及区域,不会破坏凝集素的天然寡聚结构,也不会干扰糖结合活性。在578nm波长激发下,偶联在蛋白上的AF568基团可发射出明亮的603nm橙红荧光,光谱与常规实验室Cy3通道的激光器、滤光片组高度匹配,无需额外设备调整即可直接完成信号采集。
核心产品优势
AF568 ECL的核心差异化优势集中在橙红通道的高稳定与高兼容综合表现上,相比传统同波段标记的同类凝集素,AF568染料属于罗丹明衍生物家族,摩尔吸光系数高,光稳定性显著优于传统TRITC类探针,偶联后仍能完整保留凝集素的糖结合特异性。试剂经过严格的游离染料去除工艺,游离染料残留低于2%,非特异性吸附极低,批间一致性好,水相溶解度,长期存放不易发生聚集沉淀,是橙红通道开展半乳糖末端糖链靶向研究的标杆级高稳定工具。
应用领域
AF568 ECL可用于细胞表面糖缀合物直接标记,依托其橙红通道稳定的荧光特性,通过简单孵育洗涤即可在荧光显微镜下直接观察半乳糖末端糖链在细胞表面的分布模式,获得清晰的原位成像结果。该试剂可应用于糖蛋白电泳转膜后的荧光显色,替代传统酶标凝集素完成显色检测,大幅缩短实验流程,获得可直接定量的荧光条带信号。同时它也适用于凝集素芯片的糖链结合谱信号读出,以稳定的荧光信号输出完成不同样本中靶标糖链的相对含量分析,为糖生物学相关非医疗方向研究提供可靠的高稳定工具。

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原创作者:陕西新研博美生物科技有限公司






